? 同型對照是什么？ A 同型對照 (Isotype control) 是一種與一抗保持相似特性但缺乏特異性靶標的抗體。在流式實驗中，同型對照作為陰性對照，可以區(qū)分特定抗體信號與非特異性背景染色，能夠排除干擾因素以確保實驗結(jié)果的準確性。同型對照還可以用于設定流式細胞儀的電壓，并有效節(jié)約實驗成本。
? 產(chǎn)生背景染色的原因？ A 圖1. HepG2 和 A549 細胞通過使用抗體 Caspase-3 (bs-0081R-FITC) 進行流式細胞檢測，藍色為空白對照，黃色為同型對照，綠色為特異性一抗。流式實驗中根據(jù)同型對照設置陰性閾值。
? 什么情況下應使用同型對照？ A 同型對照也不是適用于所有情況。同型對照僅能檢測不由表位引起的非特異性結(jié)合，而相似表位不同抗原，或不同表位相同抗原產(chǎn)生的交叉反應就不能被同型對照檢測。在以下情況中，實驗人員應使用同型對照以確保流式實驗的準確性：
? 如何選擇同型對照？ A 在實驗中選擇的同型對照需要與一抗的特性相匹配。合適的同種型對照應與一抗的宿主種族、Ig亞型、偶聯(lián)物、輕鏈和工作濃度相同。在流式實驗中，選擇合適的同型對照可以有效排除干擾因素，實現(xiàn)更精確的數(shù)據(jù)分析。而選用 PBS 作為空白對照則達不到同樣的效果，甚至可能誤導試驗結(jié)果。
流式檢測中的常用同型對照 抗體名稱 標記熒光素 貨號 Mouse IgG1 FITC PE PerCP Mouse IgG2a FITC PE PerCP Mouse IgG2b FITC PE PerCP Mouse IgG FITC PE APC AF488 AF594 AF647 CY3 CY5 Rat IgG FITC PE APC AF488 AF594 AF647 CY3 CY5 Rat IgG FITC PE APC AF488 AF594 AF647 地 址： 北京市通州區(qū)馬駒橋鎮(zhèn)聯(lián)東U谷西區(qū)四期67號樓 聯(lián)系人： 秦 電 話： 4009019800 傳 真： 010-58129612 Email：sales@bioss.com.cn
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