在培養細胞時,我們通常是沒有一個完美的參照物去對比每種細胞形態是否正常,只能根據細胞的三種基本形態去輔助判斷。但由于培養細胞環境各不相同,很多老師同學也無法判斷出自己的細胞形態是否正常,也會影響接下來的實驗。 今天我們小編將與大家一起對這個問題進行探討~ 細胞的基本形態 大多數培養的哺乳動物細胞根據其形態可以分為三大類: △成纖維細胞(成纖維細胞樣) △上皮細胞 △淋巴細胞 △HEF胎兒包皮成纖維細胞 △huh7人肝癌細胞 △病前 △病后 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞(永生)Raw264.7 這個時候大家肯定很想知道是什么原因導致的,一般形態異常首先考慮的就是污染原因。 污染又大致分為以下幾點:細菌污染、真菌污染、支原體污染、黑膠蟲污染。那么這幾種污染是如何區分的呢? 特征: 如果確認是細菌污染,細胞嬌貴不舍得丟掉的不要擔心,我們已經為您準備好了相應對策。 細菌的克星-抗生素 貨號 抗生素 作用對象 使用比例 儲存條件 03-049-1B 卡那霉素溶液(10mg/ml) 細菌(如G+、G-、支原體) 稀釋:1:100 -20oC 03-035-1B 硫酸慶大霉素溶液(50 mg/ml) 細菌(如G+、G-、支原體) 稀釋: 1:1000 AMB室溫 03-031-1B 青鏈雙抗 細菌(如G+、G-) 稀釋: 1:100 -20oC 03-031-5B 青鏈雙抗,10濃縮液 細菌(如G+、G-) 稀釋: 1:1000 -20oC 03-032-1B 青鏈霉素,制霉菌素三抗 細菌(如G+、G-)、真菌(如:酵母菌、霉菌) 稀釋: 1:100 -20oC 03-033-1B 青鏈霉素,兩性霉素B三抗 細菌(如G+、G-)、真菌(如:酵母菌、霉菌) 稀釋: 1:100 -20oC 03-034-1B 青鏈霉素,新霉素三抗 細菌(如G+、G-) 稀釋: 1:100 -20oC 真菌污染時會有類似棉花絮狀的漂浮物,念珠菌會呈卵圓狀,在細胞周邊生長。 早期并不會使得培養基變黃變渾濁,但是在顯微鏡下可觀察到菌絲體。真菌形成的菌絲呈絲狀,管狀,樹枝狀,串珠狀。 真菌污染至少要三天后才能長出異常瑰麗的花紋圖案。 酵母菌等,當其行出芽生殖時可通過一大一小的連體結構識別。 真菌污染整體特征是: 希望您的細胞不要也這樣“好看”,不然只能留作欣賞用途了,或者可以嘗試使用如下方法救治。 貨號 抗生素 作用對象 使用比例 儲存條件 03-029-1B 兩性霉素B(2500 ug/ml) 真菌(如:酵母菌、霉菌) 稀釋:1:1000 ~ 1: 10,000 -20oC 03-030-1C 制霉菌素(10,000 units/ml) 真菌(如:酵母菌、霉菌) 稀釋:1:100 to 1:1000 -20oC 03-032-1B 青鏈霉素,制霉菌素三抗 細菌(如G+、G-)、真菌(如:酵母菌、霉菌) 稀釋: 1:100 -20oC 03-033-1B 青鏈霉素,兩性霉素B三抗 細菌(如G+、G-)、真菌(如:酵母菌、霉菌) 稀釋: 1:100 -20oC 支原體廣泛存在于人和動物體內,消毒不完全的器具也易帶入支原體。污染時細胞培養基可能依然澄清或者呈微黃色,抽提核酸與蛋白時可有高達30~50%為支原體來源,造成結果偏差。那么支原體污染都有哪些明顯特征呢? 也可使用支原體檢測試劑盒進行檢測: 該試劑盒可檢測的14種支原體是:M.fermentans(發酵支原體), M.hyorhinis(豬鼻支原體), M.arginini(精氨酸支原體), M.Orale(口腔支原體), M.Salivarium(唾液支原體), M.hominis(人型支原體), M.pulmonis(肺支原體), M.arthritidis(關節炎支原體), M.bovis(牛支原體), M.pneumoniae(肺炎支原體), M.pirum(梨支原體)and M.capricolum(山羊支原體), as well as Acholeplasma(無膽甾原體)and Spiroplasmaspecies(螺原體)。 △電泳圖譜電泳結果(圖片來源:終端用戶僅供參考) 支原體檢測試劑盒的特異性: EZ-PCR支原體檢測試劑盒(貨號:20-700-20)。 引物與美國國家生物技術中心(NCBI)數據庫進行比對,并檢測16SrRNA靶區同源性。96種支原體具有相關序列同源性。 BIOMYC-1 貨號:03-036-1B 主要成分:太妙菌素 BIOMYC-2 貨號:03-037-1B 主要成分:Minocycline BIOMYC-3 貨號:03-038-1B 主要成分:環丙沙星 方案一 BIOMYC-1(03-036)和BIOMYC-2(03-037)的使用方法: 方案二 BIOMYC-3(03-038)的使用方法: 經濟考慮,用戶選擇一種方案即可;最佳方案是,客戶先用方案一處理一周期,再用方案二處理一周期。 友情提示:如果使用其中一種方案,不能根除支原體,說明該支原體可能在另一種方案的抑菌譜內;36,37,38三者聯合可有效根除實驗室80%以上的支原體污染。 在細胞復蘇或傳代時往往會出現黑膠蟲污染,并且與細胞呈現此消彼長的現象,但是培養基卻并不渾濁。黑膠蟲具有細胞毒性,可引起細胞生長遲緩或裂解凋亡。 目前科學界對黑膠蟲的身份并無定論,Dr.Cell目前檢測的黑膠蟲樣本,62%為細菌,38%為支原體。(→詳情點擊此處查看“黑膠蟲通緝令”) BIOMYC-1 貨號:03-036-1B 主要成分:太妙菌素 BIOMYC-2 貨號:03-037-1B 主要成分:Minocycline BIOMYC-3 貨號:03-038-1B 主要成分:環丙沙星 黑膠蟲殺除方案一 BIOMYC-1(03-036)和BIOMYC-2(03-037)和三抗(03-033)的使用方法: 黑膠蟲殺除方案二 BIOMYC-3(03-038)和三抗(03-033)的使用方法: 好啦,今天我們就分享到這里啦~下期我們會接著分享后續細胞形態異常分析的其他方面噢~ 了解詳細信息可戳原文,轉載請標明出處。
細胞是雙極或多極的,狹長型,貼壁細胞。
呈多角形,尺寸更為規則,貼附在基質上呈散斑片狀生長。
呈球形,通常懸浮生長,不貼附在基質表面。

















四、黑膠蟲污染
黑膠蟲較明顯的污染特征:


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細胞形態異常剖析 Step1
作者:上海逍鵬生物科技有限公司 2021-09-07T11:17 (訪問量:12892)
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