1. 將雞蛋敲個(gè)小洞,將注射器插入蛋黃中吸取蛋黃。
2. 將蛋黃1:9用超濾水稀釋,用稀鹽酸調(diào)pH到5.2。
3. 4℃過夜,待其自然分層,吸取上清。
4. 向上清中加入-20℃預(yù)冷冰乙酸,使其終濃度為60%,4℃攪拌20min。10,000rpm離心30min,棄上清。
5. 向沉淀中加入0.16%NaCl溶液。
6. 三層濾紙過濾,收集過濾液。
7. 濾液中加入-20度預(yù)冷的冰乙醇,使其終濃度達(dá)到30%,10,000rpm 離心25min,棄上清。
8. PBS溶解沉淀,即得到IgY抗體溶液。
9. 進(jìn)行SDS-PAGE分析純度和定量。
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