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【明星產品】 脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PLA2)

作者:武漢華美生物工程有限公司 2016-04-18T10:41 (訪問量:10657)

脂蛋白相關磷脂酶A2 (lipoprotein-associated phospholipase 2,?Lp-PLA2),亦稱血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH),PLA2G7基因編碼的441氨基酸組成,分子量約為45 kDaLp-PLA2經成熟的巨噬細胞和淋巴細胞合成和分泌,并受炎性介質的調節,具有促炎癥和促動脈粥樣硬化的作用

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近年來越來越多的證據表明其具有促進動脈粥樣硬化(AS)的作用,是AS中的一種新的炎性反應標志物。Lp-PLA2在血液中的濃度可動態地反映動脈粥樣斑塊的炎癥程度,濃度越高風險越大。此外,檢測血中Lp-PLA2水平可以用來識別冠心病的高危個體,根據Mayo Medical Laboratories的研究,當血液中Lp-PLA2濃度高于235 ng/mL,提示心肌梗死、冠心病和缺血性腦卒中等心血管疾病的發生的風險。

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Lp-PLA2為反映動脈粥樣硬化斑塊破裂及血栓形成事件的獨立風險因子,與其具有高度一致性及精確性,是急性動脈粥樣硬化血栓復發事件高風險患者的準確風險評估標志物。

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Lp-PLA2單克隆抗體

科賽格最新推出一批高質量的抗人Lp-PLA2單克隆抗體,其中4株抗體能夠用于高靈敏度的雙抗夾心法免疫檢測。利用我公司化學發光檢測平臺對自產抗體對進行表征,顯示其檢測范圍廣,靈敏度高。檢測范圍約為0.13-1000 ng/mL,最低檢出限可達0.13ng/mL。所有推薦的抗體對均經過大量正常血清樣本、動脈粥樣硬化和腦梗塞等病理樣本反復評測。

性質

參數

靶標種屬

人類

宿主

Balb/c小鼠

融合細胞

Sp2/0

免疫原

人脂蛋白相關磷脂酶A2

純化方式

Protein G 親和純化

保存緩沖液

磷酸鹽緩沖液(pH 7.6

應用范圍

Lp-PLA2免疫檢測, 免疫組化,Western blotting

貨號

CSB-DA113BmN,

CSB-DA113BmN,

CSB-DA113BmN,

CSB-DA113BmN⑤.

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標準曲線--Calibration Curve

所有的單克隆抗體分別用作捕獲抗體和標記抗體,然后組合成不同抗體對,用于雙抗夾心法免疫檢測。不同抗體對分別對各種濃度的Lp-PLA2進行定量檢測,最后選擇出最好的配對方式如下(捕獲抗體-標記抗體):

A組合:CSB-DA113BmN①-?CSB-DA113BmN③;

C組合:CSB-DA113BmN③-?CSB-DA113BmN①;

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?E組合:CSB-DA113BmN④-?CSB-DA113BmN⑤

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?圖1. 不同Lp-PLA2抗體組合的標準曲線

精密度--Precision

利用我公司的化學發光平臺對同一批次的抗體及不同批次的抗體進行精密度分析,所有抗體批內差均≤5%,批間差均≤10%通過檢測質控品Control Low、Control High,計算出批內、批間的變異系數(CV)見下表

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批內試驗?(n=10)

批間試驗(n=30)

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平均濃度

(ng/mL)

標準差

變異系數

(%)

?平均濃度

?(ng/mL)

標準差

變異系數(%)

A組合

Control Low

152.94

4.49

2.9

152.38

10.51

6.9

Control High

344.52

10.67

3.1

345.93

30.10

8.7

C組合

Control Low

157.21

5.76

3.7

157.67

14.51

9.2

Control High

349.97

11.93

3.4

351.09

31.60

9.0

E組合

Control Low

150.49

6.19

4.1

149.81

8.53

5.7

Control High

338.01

23.81

7.0

337.35

26.02

7.7

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回收率--Recovery

通過在化學發光平臺分析不同組合的抗體對,三種組合的回收率分別為99.9%、100.7%101.7%,由此可見抗體準確度可靠。

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臨床比對Clinical?Comparison

????為驗證抗體對適用于臨床檢測, 在化學發光平臺利用各種抗體對組合(ACE組合)對81例血清進行檢測,所有樣本均是經過國內和國外注冊的IVD診斷試劑盒檢測賦值。檢測結果如圖3,本公司自產抗體用于檢測臨床樣本和IVD診斷試劑盒檢測結果相關性較好,能夠滿足臨床檢測需求。

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2. 不同Lp-PLA2抗體組合對臨床血樣的檢測

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穩定性分析--Stability

將四種Lp-PLA2單克隆抗體(未 加任何保護劑)置于-20℃、2-8℃和37℃,每隔3天測抗體效價,從下圖可以看出CSB-DA113BmN①和CSB-DA113BmN③在2-8℃ 和37℃條件下抗體的效價相對于-20℃條件變化很小,說明兩只抗體很穩定;CSB-DA113BmN④和CSB-DA113BmN⑤在2-8℃條件下比 較穩定,37℃條件下抗體的效價有略微下降。

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Lp-PLA2蛋白

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????科賽格亦提供高質量的Lp-PLA2蛋白,貨號為CSB-DP113B。該蛋白以液體形式供應,可用于免疫測試的校準品、免疫印跡(WB)等方面。

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參考文獻--References

1.?Carlquist JF,??Muhlestein JB,??Anderson JL. Lipoprotein-associated phospholipase A2: a new biomarker for cardiovascular risk assessment and potential therapeutic target. Expert Rev Mol Diagn.?2007 Sep;7(5):511-7

2.?Davidson MH,?Corson MA,?et al.?Consensus panel recommendation for incorporating lipoprotein-associated phospholipase A2 testing into cardiovascular disease risk assessment guidelines.?Am J Cardiol.?2008 Jun 16;101?(12A):51F-57F.

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4.?Goldstein LB, Bushnell CD, Adams RJ, et al; on behalf of the American Heart Association Stroke Council, Council on Cardiovascular Nursing, Council on Epidemiology and Prevention, Council for High Blood Pressure Research, Council on Peripheral Vascular Disease, and Interdisciplinary Council on Quality of Care and Outcomes Research. Guidelines for the primary prevention of stroke:?a guideline for healthcare professionals from the American Heart Association/American Stroke Association.?Stroke.?2011;?42:517-584.?

5.?Greenland P, Alpert JS, Beller GA, et al. 2010 ACCF/AHA guideline for assessment of cardiovascular risk in asymptomatic adults: a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines.?J Am Coll Cardiol. 2010;56?(25):e50-e103.?

6.?Jellinger PS, Smith DA, Mehta AE, et al; the AACE Task?Force for Management of Dyslipidemia and Prevention of Atherosclerosis. American Association of Clinical Endocrinologists’ Guidelines for Management of Dyslipidemia and Prevention of Atherosclerosis.?Endocr Pract.?2012;18?(Suppl 1):1-78.?

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