報告基因檢測，是真核基因表達調(diào)控研究的常用方法。由于檢測光量子的方法非常敏感，采用生物發(fā)光(bioluminescent)法，是報告基因檢測最常用的有效手段。熒光素酶(luciferase)催化底物熒光素的轉(zhuǎn)化，發(fā)射出光子。螢火蟲熒光素酶(Firefly luciferase)和海腎熒光素酶(Ranilla luciferase)催化的發(fā)光反應(yīng)，具有相似的光學(xué)特征和很好的濃度線性范圍(7~8個數(shù)量級的線性范圍)，酶的檢測靈敏度達10-18mol到10-20mol，但兩者催化的化學(xué)反應(yīng)底物和最適反應(yīng)條件完全不同。這兩種熒光素酶配合形成了十分有效的雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)，其中Ranilla luciferase通常作為內(nèi)參照。
本試劑盒提供了一體化形式的雙熒光素酶檢測系統(tǒng)。采用通用裂解緩沖液，適合于兩種熒光素酶活性的保持，且與其他類型的報告基因檢測和蛋白含量檢測兼容；優(yōu)化的兩種酶反應(yīng)體系，使每種發(fā)光反應(yīng)持續(xù)數(shù)十分鐘，以便于手工操作多個樣品；并保證Firefly luciferase發(fā)光及時淬滅，不影響后續(xù)Ranilla luciferase的測定；優(yōu)化的反應(yīng)體系還使兩種熒光素酶活性比值趨于合理的敏感范圍，更有利于后續(xù)數(shù)據(jù)的比較。
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產(chǎn)品內(nèi)容與儲存方法： 名稱 數(shù)量 保存條件
5x Universal Lysis Buffer (通用裂解液) 25 ml -20℃
Fassay Buffer I (蟲酶緩沖液) 10 ml -20℃
Fassay Substrate I (蟲酶底物) 0.5 ml -20℃
Rassay Buffer II (海酶緩沖液) 10 ml -20℃
Rassay Substrate II (海酶底物) 0.2 ml -20℃
可作100次雙熒光素酶檢測。低溫運輸，-20℃或-80℃避光保存。有效期6個月。
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