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清洗與滅菌如何處理?

作者:上海遠慕生物科技有限公司 2016-04-29T00:00 (訪問量:5948)

清洗與滅菌如何處理?

一、實驗目的

能獨立地進行用于細胞培養的各種器皿的清洗與消毒,掌握干熱滅菌法、濕熱滅菌法和濾過除菌法的操作,了解化學消毒法的使用方法。

二、實驗原理

清洗與消毒是組織培養實驗的第一步,是組織培養中工作量最大,也是最基本的步驟。體外培養細胞所使用的各種玻璃或塑料器皿對清潔和無菌的要求程度很高。細胞養不好與清洗不徹底有很大關系。清洗后的玻璃器皿,不僅要求干凈透明,無油跡,而且不能殘留任何物質。如有毒的化學物質,哪怕殘留0.1個,也可能影響細胞生長。滅菌手段的選擇十分重要,對不同的物品需采用不同的滅菌方法。假如選用的方法不對,即使達到了無菌卻使被滅菌藥品喪失了營養價值、生物學特性或其他使用價值也不行。以下在每種滅菌步驟中都介紹其使用范圍。

三、實驗材料、用品

材料:無臭氧型紫外燈,微孔濾膜(直徑25):孔徑為0.22μm,微孔濾膜(直徑90):孔徑為0.22 μm,過濾器(直徑25)。

藥品:70%或75%酒精,0.1%新潔爾滅,煤酚皂溶液(來蘇兒水),0.5%過氧乙酸,乳酸,37%甲醛,高**鉀,NaOH,鹽酸,重鉻酸鉀,濃硫酸(工業),DEPC水[體積分數0.1%的焦炭酸二乙酯(diethylpyroearbonate)]。

儀器:超凈臺,干燥箱,高壓鍋,過濾器,過濾泵。

四、實驗步驟

(一)清洗

1.新玻璃器皿的清洗先用自來水刷洗,再浸泡5%稀鹽酸以中和玻璃表面的堿性物質和其他有害物質。

2.使用過的玻璃器皿的清洗

(1)使用過的培養用品應立即浸入清水,避免干涸難洗。

(2)用洗滌劑清洗玻璃器皿,自來水清洗數遍,倒置自然干燥。

(3)浸酸性洗液過夜。

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