前沿研究成果發布-質譜流式技術助力新冠肺炎治療研究-技術前沿-資訊-生物在線

前沿研究成果發布-質譜流式技術助力新冠肺炎治療研究

作者:思百拓(上海)儀器科技有限公司 2022-03-10T16:57 (訪問量:10806)

近日,一項由多家國內外醫院和研究機構參與的COVID19臨床研究成果在《Aging and Disease》雜志上公開發表。此項研究將間充質干細胞(MSCs)移植用于新冠肺炎患者的治療,取得了良好的治療效果,為新冠肺炎的治療做出了有益的探索。

相關的臨床報告表明,COVID19病毒感染可以刺激肺部發生嚴重的細胞因子風暴,涉及IL-2,IL-6,IL-7,GSCF,IP10,MCP1,MIP1A和TNFα等多種不同的細胞因子的過渡分泌,進而引發水腫,空氣交換功能障礙,急性呼吸窘迫綜合征,急性心臟損傷和繼發感染,進而導致患者死亡。

在此項研究中,在接受MSCs移植后的2天后,所有7個新冠肺炎患者肺功能和臨床癥狀得到明顯改善。治療后10天,2名普通患者和1名危重患者康復出院。

為了從細胞和分子水平揭示該治療方案的作用機制,研究人員使用質譜流式平臺分析了治療前和治療后的病人的外周血樣本。質譜流式(Mass Cytometry)利用金屬元素作為抗體的標簽,以質譜作為檢測手段,可同時分析單細胞表面和內部的50多種標志物,在單細胞水平檢測胞內外不同Marker的表達情況,進而系統能夠全面、系統地了解樣本細胞表型和功能的改變。

根據已有信息,研究人員在此次實驗中總共進行了近40個通道的檢測,包含36個抗體分子(28個表面marker和8個胞內Cytokine),以及若干核酸和細胞死活的金屬標簽染料。其中,3個帶有不同金屬標簽的CD45抗體被用來做“living Cell barcorde”,即用不同標簽的CD45抗體分別染同一病人3個不同時間點的樣本,混合后再進行其他抗體的染色,以此消除細胞計數,操作誤差對實驗結果的影響,進一步提高數據的質量。

結果表明,相比治療前,病人外周血的亞群組成發生了顯著變化。主要表現為治療后外周血淋巴細胞增多,過分活化的分泌細胞因子的免疫細胞亞群CXCR3 + CD4 + T細胞,CXCR3 + CD8 + T細胞和CXCR3 + NK細胞也在3-6天內消失;一組CD14 + CD11c + CD11bmid調節性DC細胞數量急劇增加。tSNE降維結果直觀的展示出病人在治療前后這種顯著的亞群改變,可以明顯看出在治療后(左),免疫亞群的組成更加接近健康對照(右)。

此外,在此篇文章中,作者還運用了單細胞測序技術對于移植后的MSC的基因表達進行了系統的分析。

在此,我們向所有國內外奮戰在抗疫一線的工作人員和研究人員致敬。同時,Fluidigm公司也愿意為所有參與新冠肺炎研究的客戶提供力所能及的技術支持,為早日平息疫情貢獻自己的力量。期待春暖花開的那一天早日到來!


參考文獻:
Leng Zikuan,Zhu Rongjia,Hou Wei, et al. Transplantation of ACE2- Mesenchymal Stem Cells Improves the Outcome of Patients with COVID-19 Pneumonia[J]. Aging and disease, 2020, 11(2): 216-228.



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