參選項目:酯酶同工酶染色方法優化
背景:
酯酶同工酶標記在靈芝屬菌種鑒定中的應用中文摘要靈芝是我國重要的傳統中藥材,其傳統分類鑒定主要依據形態指標。但是靈芝的形態特征易受到光線,基質營養狀況等環境因素的影響而發生改變,從而造成了分類與命名不準確,出現同名異種及同種異名的混亂現象,不能客觀地反映株間及各分類單元之間的遺傳差異性。
本試驗對不同來源的8種32株靈芝菌株進行了醋酶同工酶分析,以期揭示菌株間的遺傳差異性,為靈芝的系統分類和育種奠定基礎。結果如下: 1.EST 同工酶從酶帶數及酶活性上看,在亞科間、屬間、種間差異都很明顯,因而可以作為不同亞科間、屬內不同種間、不同屬不同種間的分類指標。 2.通過對32個菌株的酯酶同工酶酶譜研究及聚類分析,在相異系數為0.59時所有供試菌株歸為一個群。在相異系數為0.86時,把8種菌株分為4個群。日本赤芝與長白山野生赤芝歸為一個類群,說明它們之間有著極大的相似性,是一種同種異名的現象。同樣存在同種異名現象的還有赤芝001與泰國靈芝,赤芝與黃芝。其次,在相異系數為0.8時,長白山野生赤芝、日本赤芝、日本靈芝可以歸為一個大群,說明三者親緣關系很近,紅芝與其他7種靈芝都不歸為一類,說明其親緣關系相對較遠。
方法改進:
通過對酯酶同工酶染色試劑的選擇,染色時間,pH值,溫度,藥品用量等條件的優化,使酯酶同工酶染色效果更清晰,條帶整齊。在進行動植物種類同工酶鑒定的應用中有著深遠的意義。
結果:
通過對酯酶同工酶染色試劑的選擇,染色時間,pH值,溫度,藥品用量等條件的優化,使酯酶同工酶染色效果更清晰,條帶整齊。在進行動植物種類同工酶鑒定的應用中有著深遠的意義。
