3T3細胞是一種來源于小鼠胚胎的成纖維細胞株,于1962年由瑞士細胞生物學家George Todaro和Howard Green首次從小鼠胚胎繁殖層中分離培養獲得。其名稱來源于“3天傳代,接種體積3x105個細胞”的傳代方法。中華人民共和國藥典中將其作為測定部分細胞因子細胞活性的工具細胞。
3T3細胞的主要特點包括:
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能夠無限增殖,具有長期傳代能力。
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容易培養,生長迅速,對培養條件要求低。
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細胞形態一致,無轉化性。
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可作為多種病毒的宿主細胞。
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可用于細胞融合實驗。
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可誘導分化為脂肪細胞。
3T3細胞的傳代培養方法:
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常規以3-4天為一個傳代周期進行1:4或1:6稀釋傳代。
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用0.25%胰酶消化收集細胞,離心棄上清。
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調整細胞密度,接種于培養皿或培養瓶中,置于37°C、5% CO2培養箱培養。
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當細胞生長進入對數生長期時傳代。
需要注意的事項:
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避免細胞污染。傳代時做好無菌操作。
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傳代時注意細胞狀態,過度生長或老化會影響實驗結果。
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定期進行細胞活力檢測,確保細胞活力良好。
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細胞復蘇后需要進行傳代恢復,至少傳代3代以上才可用于實驗。
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傳代時要控制細胞密度,避免細胞過稀或過密。
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傳代周期和比例要根據實驗需求調整。