NC（Nitrocellulose，**纖維素）膜在免疫層析檢測(cè)技術(shù)起著至關(guān)重要的作用。因其具有高蛋白結(jié)合能力和優(yōu)秀的層析性能，可用作免疫層析檢測(cè)試劑中檢測(cè)線T和質(zhì)控線C的固相支撐介質(zhì)。通過免疫反應(yīng)顯色，用戶可以直接在膜上判讀結(jié)果。 ? ? 受國家政策的引導(dǎo)和市場(chǎng)需求的推動(dòng)，近年來POCT廠商對(duì)NC膜的需求急速攀升。作為核心原材料，NC膜的質(zhì)量和性能將直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。那么POCT廠商應(yīng)該如何對(duì)不同供應(yīng)商的NC膜進(jìn)行評(píng)價(jià)和選擇呢？ 通常，影響NC膜性能的指標(biāo)包括： 外觀 厚度 幅寬 背襯 爬速 蛋白吸附 外觀 外觀可在光源下進(jìn)行目視檢查。膜表面如果不平整、光滑，有異物、粉塵、針眼、劃痕或壓痕等缺陷，一方面會(huì)影響C/T線質(zhì)量，造成斷線、粗細(xì)不均等缺陷；另一方面，則會(huì)影響液體在膜內(nèi)的流動(dòng)，導(dǎo)致液流不規(guī)則。 質(zhì)量合格的膜 有缺陷的膜 劃膜缺陷示意 厚度 厚度可采用測(cè)厚儀進(jìn)行測(cè)量，在NC膜上選擇幾個(gè)點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量以考察其均勻性。厚度若不均勻，會(huì)導(dǎo)致劃出來的C/T線寬窄不一。在捕獲試劑用量不變的情況下，膜越厚C/T線越窄，反之亦然。 幅寬 幅寬可采用普通直尺或游標(biāo)卡尺測(cè)量。常用的幅寬有20mm和25mm兩種規(guī)格，廠家可根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)工藝的需求進(jìn)行選擇，特殊的規(guī)格也可與供方協(xié)商定制。 背襯 NC膜有無背襯和帶背襯兩種類型。由于材質(zhì)本身特性，無背襯NC膜很脆，容易破裂，加工過程存在一定的難度。帶背襯NC膜是直接將**纖維素聚合物澆筑在透明的基帶上成型后得到。 得益于背襯的存在，一方面使得NC膜強(qiáng)度得到提高，易于生產(chǎn)、加工操作；另一方面，在粘貼到PVC膠板后，背襯可以有效地阻隔膠內(nèi)物質(zhì)遷移進(jìn)入NC膜，避免對(duì)性能造成影響。 爬速 起泡點(diǎn)測(cè)試是表征濾膜孔徑最常用的方法，但是它只適用于測(cè)定垂直流動(dòng)方向的膜孔徑，對(duì)測(cè)定側(cè)向流動(dòng)方向的膜孔徑并不適用。 目前，行業(yè)內(nèi)統(tǒng)一采用爬速測(cè)試的方法來表征側(cè)向流動(dòng)方向的膜孔徑。爬速可以用秒表測(cè)定純化水從膜的底部通過毛細(xì)作用“爬”到4cm頂端所用的時(shí)間（s）得到。根據(jù)爬速的不同，NC膜一般可分為快流速、中流速和慢流速三類。流速越快，意味著孔徑越大。 爬速測(cè)試示意 爬速是非常重要的指標(biāo)，其影響主要包括： 一定范圍內(nèi)，流速越快，檢測(cè)時(shí)間越短； 流速加快，反應(yīng)時(shí)間縮短，分析物表觀濃度降低，導(dǎo)致靈敏度降低； 流速越慢，發(fā)生非特異性結(jié)合的可能性就越大。 所以，實(shí)際在開發(fā)免疫層析檢測(cè)試劑時(shí)需要綜合考慮上述影響以達(dá)到性能的最佳平衡。 蛋白吸附 如何將捕獲分子持續(xù)、牢固的結(jié)合在檢測(cè)線T和質(zhì)控線C，是生產(chǎn)一個(gè)靈敏、可靠的免疫層析檢測(cè)試劑的關(guān)鍵。雖然NC膜自第一次制備以來至今已有一百余年，但是其與蛋白結(jié)合的真實(shí)機(jī)理科學(xué)家們?nèi)晕催_(dá)成共識(shí)。目前普遍認(rèn)同的是，NC膜與蛋白的結(jié)合是彼此之間疏水作用力、氫鍵以及靜電吸力三者共同作用的結(jié)果。蛋白與膜結(jié)合能力的強(qiáng)弱將直接影響檢測(cè)靈敏度和C/T線的寬度。 一般來說，影響NC膜和蛋白結(jié)合的因素包括： 1）制膜材料本身的性質(zhì)； 2）比表面積； 3) 表面活性劑的含量。 制膜材料的影響。不同廠家生產(chǎn)的NC膜雖然都是由**纖維素制成，但是不同原材料在性能上存在一定差異，會(huì)導(dǎo)致與蛋白的結(jié)合能力有不所同。 比表面積。比表面積越大，意味著膜內(nèi)聚合物表面積越大，可與蛋白進(jìn)行結(jié)合位點(diǎn)越多，蛋白結(jié)合能力越強(qiáng)。 表面活性劑含量。表面活性劑對(duì)NC膜起到潤濕的作用，但是濃度過高則可能會(huì)影響NC膜與蛋白的結(jié)合。 除了按供方提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)方法對(duì)NC膜的各項(xiàng)性能指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證外，POCT廠商還可以結(jié)合自己的生產(chǎn)工藝對(duì)其性能(如靈敏度、特異性等)進(jìn)行確認(rèn)，從而選擇一款滿足實(shí)際生產(chǎn)需求的NC膜。
如何進(jìn)行NC膜的評(píng)價(jià)和選型？
作者：浙江泰林生物技術(shù)股份有限公司 2022-04-21T15:06 (訪問量:16291)
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