針對抗體(非IgM亞型)的生物素微量標(biāo)記:
a.抗體的固定分離
1)取出抗體固定磁珠,吸頭(用剪刀剪去吸頭尖部,使吸口變大)吹打成懸濁液,立即取出適量磁珠懸濁液(此時(shí)磁珠為50%懸濁液,按照100ul懸濁液對應(yīng)1mg抗體),加到1.5ml離心管中,將離心管放入磁力架上,待磁珠被全部吸附到離心管側(cè)壁,將移液器吸頭插入到離心管底部吸干磁珠保護(hù)液;
2)將離心管移出磁力架,加入1ml PBS緩沖液,吹打成懸濁液,重新放入磁力架靜置,待磁珠被全部吸附到離心管側(cè)壁,將移液器吸頭插入到離心管底部吸干PBS;
3)重復(fù)1.抗體的固定分離-2) 三次;
4)將磁珠離心管移出磁力架,待標(biāo)記抗體(抗血清,腹水或者細(xì)胞上清)用PBS調(diào)整為約2mg/ml濃度,加入磁珠離心管中,蓋緊管蓋,放在離心管旋轉(zhuǎn)搖床上搖晃30分鐘;
5)將離心管重新放回磁力架,待磁珠被全部吸附到離心管側(cè)壁,將移液器吸頭插入到離心管底部吸干液體;
6)重復(fù)1.抗體的固定分離-2) 三次;
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