DiMPro^TM全長膜蛋白

跨膜蛋白及藥物研發

跨膜蛋白作為細胞膜的重要組成部分, 在物質運輸、信號轉導和細胞間識別等多種細胞功能中發揮著重要作用。其功能異常往往會導致疾病的發生，這使它們成為理想的藥物作用靶點。目前以跨膜蛋白為藥物靶點占現階段己知藥物靶點的60%以上。而針對抗體藥靶點，膜蛋白幾乎占90%以上。

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跨膜蛋白在物質運輸、信號轉導和細胞間識別等多種細胞功能中發揮重要作用

抗原制備

盡管有著重大的意義，針對跨膜蛋白的藥物開發仍然具有很大的挑戰性，主要是因為跨膜蛋白的疏水結構，使得其在體外很難以可溶性蛋白形式保持其天然構象，同時全長多跨膜蛋白通常表達水平較低，這些都是跨膜蛋白表達的難點所在。如何獲得最為天然構象和具有功能活性的膜蛋白是開發這一類靶點抗體藥物的核心所在。目前針對跨膜蛋白靶點，其抗原開發策略及相關問題如下：

1. 表達胞外結構域（ECD）：表達胞外N端或LOOP區結構域的方法簡單，并且相對而言有較高的表達量，是行之有效的方法之一。但是對于多跨膜蛋白而言，表達蛋白胞外區的方式很難模擬蛋白的天然構象，可能造成一些抗原表位（比如構象表位）的遺失，也有可能對蛋白活性有一定的影響。
2. 全細胞：全細胞免疫被廣泛用于針對跨膜蛋白的抗體制備。目標膜蛋白保持了自己的天然構象和修飾，具有高免疫原性，不需要復雜的純化步驟。然而，全細胞成分較復雜，包含胞漿等多種雜蛋白組分，容易產生針對該細胞的非特異性抗體，特別是針對大量的胞內蛋白。
3. 全長膜蛋白：具有天然構象的全長膜蛋白無疑是跨膜蛋白藥物開發中的最佳抗原。然而全長膜蛋白在細胞中的表達水平通常比較低，而且不容易被分離純化成為可溶性抗原。如何獲得背景干凈的富含靶點膜蛋白的可溶性抗原一直是抗體藥研究的熱點課題，也是締碼生物長期以來專注的研究方向。

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為助力藥物研發，解決跨膜蛋白靶點開發過程中抗原制備的難題，締碼生物專門搭建了多個跨膜蛋白全長表達平臺。其中，納米膜顆粒（MNP）平臺是締碼生物主推的平臺，它與病毒樣顆粒（VLP）和外泌體（EXO）一起，是締碼現有的3大全長膜蛋白制備平臺。同時締碼生物也正在開發去垢劑和合成納米盤平臺。

締碼生物全長膜蛋白表達方案

納米膜顆粒（MNP）

代表MNP產品

Human CLDN6 full length protein-MNP??
Human CCR8 full length protein-MNP?
Human CD24 full length protein-MNP?

產品數據圖

A. Negative Control 1: CCR8 full length membrane nanoparticles samples were stained only with Goat anti-human lgG 488 secondary antibody.
B. Negative Control 2: Control membrane nanoparticles samples were stained with anti-CCR8 antibody (BME100063) at 2 μg/mL, followed by Goat anti-human IgG 488 secondary antibody.
C. Negative Control 3: CCR8 full length membrane nanoparticles samples were stained with anti-Claudin 18.2 antibody （an irrelevant antibody) at 2 μg/mL, followed by Goat anti-human IgG 488 secondary antibody.
D. CCR8 full length membrane nanoparticles samples were stained with anti-CCR8 antibody (BME100063) at 2 μg/mL, followed by Goat anti-human IgG 488 secondary antibody.

Western blot of CCR8 membrane nanoparticles?(MNPs)

病毒樣顆粒（VLP）

細胞在感染病毒后會從細胞膜表面通過一種類似細胞膜出芽的方式分泌100-150nm左右的納米膜顆粒。VLP帶有完整的磷脂雙分子層膜結構，膜蛋白以天然穿膜狀態展示。

代表產品

產品數據圖

ELISA plates were pre-coated with 0.5ug/per well purified human Claudin 18.2 VLP. Serial diluted Anti-Claudin18.2 monoclonal antibody (Zolbetuximab biosililar; IMAB362) solutions were added, washed, and incubated with secondary antibody before ELISA reading. From above data, the EC50 for IMAB362 binding with Claudin18.2 is 15.37ng/ml.

Negative Control 1: Claudin18.2 VLP samples were stained only with Goat anti-human IgG Fc-PE secondary antibody.??
Negative Control 2: Control VLP samples were stained with anti-Claudin18.2 antibody（Zolbetuximab biosililar; IMAB362）at 1ug/mL, followed by Goat anti-human IgG Fc-PE secondary antibody.? ?
Negative Control 3: Claudin18.2 VLP samples were stained with anti-BCMA antibody（an irrelevant antibody）at 1ug/mL, followed by Goat anti-human IgG Fc-PE secondary antibody.? ?
Claudin18.2 VLP samples were stained with anti-Claudin18.2 antibody（Zolbetuximab biosililar; IMAB362）at 1ug/mL, followed by Goat? anti-human IgG Fc-PE secondary antibody.

外泌體（EXO）

外泌體是直徑在30-150nm的納米顆粒，具有典型的脂質雙分子層結構，主要來源于細胞膜內陷形成內體（endosome），然后內體內陷形成多囊泡體（MVBs），多囊泡體外膜與細胞膜融合后將外泌體釋放到胞外基質中。外泌體膜攜帶了細胞膜蛋白，膜蛋白以天然穿膜狀態展示。

代表產品
Human CD24 full length protein-EXO
Human GPRC5D full length protein-EXO
產品數據

Figure 1.?ELISA plates were pre-coated with 0.5 μg/per well purified human CD24 exosome. Serial diluted Anti-CD24 monoclonal antibody solutions were added, washed, and incubated with secondary antibody before ELISA reading. From above data, the EC50 ?is 69.61 ng/ml.

Figure 2.?Nanoparticle Tracking Analysis of CD24 exosomes

Figure 3.?TEM image of CD24 exosomes

去垢劑（Detergent）

代表產品
Claudin-6 全長膜蛋白（含1%DDM去垢劑）

合成納米盤（Synthetic Nanodisc）