??? 人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）elisa試劑盒實驗原理：
??? 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）表達。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）相結合，經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）的存在與否。
??? 人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）ELISA試劑盒操作步驟：
??? 1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
??? 2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先
??? 加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
??? 3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
??? 4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
??? 5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
??? 6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
??? 7.溫育：操作同3。
??? 8.洗滌：操作同5。
??? 9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
??? 10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
??? 11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
??? 人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）ELISA試劑盒計算和結果判定：
??? 試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值（CUTOFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUTOFF）者為人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）陰性陽性判定：樣品OD值≥臨界值（CUTOFF）者為人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）陽性。人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）ELISA試劑盒的實驗原理 人ELISA試劑盒 遠慕生物 ELISA檢測試劑盒?
人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）ELISA試劑盒的實驗原理
作者：上海遠慕生物科技有限公司 2016-07-11T00:00 (訪問量:8451)
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