? 長鏈非編碼RNA(lncRNA)是一類長度大于200個核苷酸，不具有蛋白編碼能力的線性RNA分子，基因組DNA轉錄生成lncRNA后，一些lncRNA在細胞核內發揮功能，另外一些lncRNA被轉運到細胞質，在細胞質中lncRNA可以調控mRNA穩定性、翻譯效率和干擾蛋白翻譯后修飾。 ? LncRNA分類 LncRNA根據其相對位置在調控靶編碼基因中發揮重要作用，根據其在基因組上與編碼基因相對位置的不同，可以將lncRNA分為以下幾類（見圖1）：1.啟動子區（來自啟動子區域的轉錄本）；2.內含子間（主要產生于編碼基因的內含子區）；3.雙向（與蛋白質編碼基因共享相同的啟動子，但轉錄方向相反）；4.正義鏈（轉錄方向與蛋白質編碼基因方向相同，存在于同一編碼基因正義鏈，具有重疊的外顯子）；5.反義鏈（轉錄方向與蛋白質編碼基因方向相反，存在于反義鏈，至少有一個外顯子重疊）；6.3’UTR區（來自3’UTR區域的轉錄本）；7.基因間（來自于兩個蛋白質編碼基因之間的DNA序列）。與mRNA類似，lncRNA也可以存在于細胞核或細胞質中，但主要位于細胞核。 ? ? 圖1 長鏈非編碼RNA分類 來源：Xiaomei Huang et al., Canner Lett. 2018 ? LncRNA對基因表達的調控 由于lncRNA的復雜性和多樣性，不能簡單地根據其結構或序列來描述其功能，但lncRNA的一個重要作用是調節鄰近蛋白編碼基因的表達。LncRNA在不同水平上調節基因表達： ? 表觀遺傳修飾 表觀遺傳修飾是指在細胞核DNA序列不發生變化的情況下，基因表達發生可逆和可遺傳的變化，這種修飾包括染色質重塑、DNA甲基化和組蛋白修飾。 1.組蛋白乙酰化：組蛋白乙?；倪^程促進了基因表達、蛋白質活性或生理過程。 2.染色質修飾復合物的招募：lncRNA將染色質修飾復合物招募到特定的位點，介導相關基因的表達或沉默。 3.DNA甲基化：通過改變染色質結構、DNA構象、DNA穩定性以及DNA與蛋白質的相互作用來控制基因的表達。 ? 轉錄調控 4.轉錄調節：LncRNA可抑制靶基因轉錄因子活性，抑制其基因表達。如lncRNA的轉錄干擾臨近基因的表達；lncRNA通過封阻啟動子區域干擾基因表達；lncRNA與RNA結合蛋白作用，定位到基因啟動子區調控基因表達；lncRNA能調節轉錄因子活性，調控基因表達。 ? 轉錄后調控 5.可變剪接：LncRNA可以促進pre-mRNA和可變剪接因子的結合，有助于產生成熟mRNA。 6.競爭性RNA：LncRNA可以作為miR海綿，競爭miRNA，然后解除對靶基因的抑制。 7.蛋白去磷酸化：LncRNA參與蛋白去磷酸化。 8.抑制蛋白降解：LncRNA與蛋白質相互作用并抑制其泛素化降解。 ? ? 圖2 LncRNA在不同水平上調節基因表達 來源：Xiaomei Huang et al., Canner Lett. 2018 ? ? LncRNA雖然不能編碼蛋白質，但可以向下游傳遞信息，調控基因表達，表明lncRNA可能作為基于RNA的信息庫，具有與蛋白質組學競爭的能力，在疾病診斷和靶向治療中甚至比蛋白質更加敏感和特異。因此lncRNA的研究越來越廣泛。 ? 慢病毒包裝系統缺陷 但是，目前lncRNA慢病毒包裝系統普遍存在一些問題： 1.慢病毒是RNA病毒，lncRNA的轉錄終止需要polyA，而polyA會導致慢病毒包裝過程中，慢病毒基因組的表達提前終止，導致慢病毒包裝不成功； 2.常規慢病毒載體表達lncRNA，由于不能及時終止，會帶有WPRE等無關序列，從而影響lncRNA的高級結構, 而高級結構是lncRNA發揮功能的決定性因素, 這些多余的序列勢必對lncRNA的功能造成不可預料的影響； 3.有些lncRNA會發生自切割，包裝時，慢病毒基因組也可能因為lncRNA的自切割而發生斷裂，導致出毒失敗。 ? 針對以上這些問題，和元生物推出新升級慢病毒系統一次性解決以上問題，讓lncRNA精確表達。 新升級慢病毒系統優勢 1.LncRNA精準表達。 2.載體上熒光表達更亮。 3.改善由于基因引起的不出毒，出毒更穩定。 ? 驗證結果： PCR驗證表達精確： ? ? ? 和元研發團隊專注于病毒載體及包裝系統進行研發，對慢病毒主要元件進行改進和優化，并獲得相關授權**。 ? ? ? 別人只追求滴度時，我們還追求更有效； 別人只追求純度時，我們還追求更安全； 別人只追求承諾時，我們還追求更真實； 別人只追求周期時，我們還追求更穩定。 ? 在看不見的地方努力， 只為給您提供穩定的高品質產品！ ? ? 和元生物用心做科研 讓基因遞送觸手可及 ? ?
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參考文獻
[1] Xiaomei Huang,Xi Zhou., et al. Advances in esophageal cancer: A new perspective on pathogenesis associated with long non-coding RNAs.Cancer Lett.2018 Jan 28;413:94-101.doi: 10.1016/j.canlet.2017.10.046.