?T4 RNA連接酶2
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| 截短型T4 RNA連接酶2為T4 RNA連接酶2的突變體，能特異性將5’末端預腺苷化的DNA或RNA連接到RNA的3’ OH末端。與野生型與T4 RNA連接酶2相比，截短型T4 RNA連接酶2催化的的連接反應無需ATP，但需預腺苷化接頭，這樣連接反應的背景最大程度的降低，同時降低賴氨酰腺苷化酶的活性。該酶可用于二代測序small RNA 的文庫構建，優化了接頭的連接過程。 |  |
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組分 |
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應用 |
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活性定義 |
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| 200單位指在標準反應體系，25℃反應條件下，1h能將80%的31-merRNA連接到預腺苷化的17-merDNA末端所需的酶量。 | |||||||||||||
儲存 |
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| -20℃可保存3年。 | |||||||||||||
使用注意事項 |
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| 1. 1× T4 RNA Ligase Buffer：50mM Tris-HCl pH 7.5，10mM MgCl2，1mM DTT。該酶反應時不需要ATP。 2. 最佳反應溫度37℃，65℃ 10min可使該酶失活。 3. 該酶的連接接頭需要5’-預腺苷化，不能連接磷酸化底物。 4. 該酶不能連接雙鏈DNA或RNA。 5. 加入終濃度5~10% PEG 8000可提高連接效率。 |
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