1 Alexa Fluor系列染料概述
Alexa Fluor(AF)是美國分子探針公司(Molecular Probes,Inc)開發的系列熒光染料,通過磺酸化香豆素、氧雜蔥、花菁類合成?;撬狨セ鶊F的引入使得Alexa染料呈負電性和親水性,具有更好的光學穩定性、發光強度以及pH的適應性,可以勝任蛋白標記等各種要求較高的生物標記實驗。
Alexa Fluor系列染料,其激發光和發射光光譜覆蓋大部分可見光和部分紅外線光譜區域,對絕大多數熒光顯微鏡都適用。根據不同的最佳激光掃描光譜,Alexa Fluor系列染料可分為幾種不同的類型,具體如下表。
2 Alexa Fluor系列染料標記方式
生物偶聯試劑最重要的特征是其化學反應基團,它是化學修飾方法和機制建立的基礎。常見的用作生物偶聯靶標(生物大分子)的功能基團包括伯胺、巰基、羰基、碳水化合物以及羧酸,根據功能基團的種類不同,需選擇對應化學反應性基團的熒光染料。
作為熒光探針,Alexa Fluor染料的活性基團與生物分子中的特定位點相偶聯形成穩定結構,從而實現對蛋白質、核酸等生物分子的Alexa Fluor熒光標記。長沙瀚辰生物科技有限公司可提供多種Alexa Fluor熒光染料,涵蓋不同波段,可適用于不同檢測通道,滿足您更加精細的實驗需求。
3 Alexa Fluor系列染料的優點
對于熒光探針,好的光穩定性是靈敏度高、特異性強的基礎。相較于傳統有機熒光染料,Alexa Fluor系列染料具有以下優勢。
①發射光譜窄。
相較于傳統有機熒光染料,Alexa Fluor染料具有較窄的發射光譜,從而降低不同檢測的交叉水平。
②熒光強度強,光穩定性好。
通過對Alexa Fluor、熒光素、羅丹明6G、四甲基羅丹明和Cy3等染料標記羊抗鼠抗血清、鏈霉親和素等生物分子的熒光信號強度進行對比分析發現,盡管這些染料具有與Alexa Fluor染料類似的發射和激發光譜,但在各染料的吸收和發射光譜范圍內Alexa Fluor染料量子產率更高、熒光強度更強、光穩定性更好。
③受溫度和pH的影響較小。
研究發現Alexa Fluor標記細菌,在100℃高溫下染料仍可保持穩定性12h以上,可用于原位分析研究。另外,對Alexa Fluor染料的發射光譜、吸收光譜和熒光信號強度進行研究,證明Alexa Fluor染料對pH變化不敏感,可在pH為4~10時保持穩定結構和強熒光。
④具有良好的水溶性。
無需有機試劑Alexa Fluor染料即可結合蛋白質,且儲存不易產生沉淀。在簡單緩沖溶液中Alexa Fluor染料表現出很少的衰落。
⑤可通過標記,對不同對象進行區分。
Alexa Fluor系列染料具有不同的顏色,可根據實驗需要,用不同Alexa Fluor染料標記不同的對象,從而實現區分。
⑥價格實惠,使用方便。
隨著Alexa Fluor染料在醫學和農業領域的廣泛應用使其商業生產得到了基本普及,價格實惠;其標記產品的生產降低了實驗的復雜程度。
4 Alexa Fluor系列染料用途
Alexa Fluor系列染料可用于單分子檢測、熒光標記、細胞生物學、生物物理過程等生物科學研究的各個方面,用途較為廣泛。
5 相關目錄
長沙瀚辰生物科技有限公司提供各類熒光染料、生物素、地高辛標記物,依據用戶需求,可自主選擇帶不同反應基團的標記物,如NHS、Maleimide、Carboxylic acid等,實現對抗體、多肽以及核酸探針等的標記。
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