血漿游離血紅蛋白測定方法
ELISA試劑盒分析：血漿游離血紅蛋白測定方法
實驗原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態氧，使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化，由無色最終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較，可測出其含量。
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實驗方法
材料：
1．2g/L鄰甲聯苯胺溶液
2．1%H2O2
3．10%醋酸溶液
4．分光光度計
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方法：
1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝，離心分離血漿。
2．按下表進行操作，用分光光度計，波長為530nm，以空白管調零，測定測定管的吸光度。
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試劑 （ml）
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測定管
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空白管
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2 g/L鄰甲聯苯胺溶液
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0.5
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0.5
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患者血漿
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0.02
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/
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1% H2O2
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0.5
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0.5
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混勻后室溫放置10min
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10%醋酸溶液
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5.0
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5.0
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室溫放置10min
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3.計算公式
血漿游離Hb（mg/L）=測定管吸光度/標準管吸光度×100
實驗結果計算
參考范圍：0-40mg/L
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注意事項
1.一切容器避免血紅蛋白污染；
2.采血要順利，器皿要干燥，檢測血漿要新鮮，及時分離，防止人為溶血；
3.鄰聯苯胺溶液具致癌性，檢測時要小心，廢液要妥善處理，以免污染；
4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準確