有小伙伴表示，養細胞就像養孩子，要小心翼翼地伺候著。然而在小編看來，養細胞更像養祖宗。孩子我們尚且可以教育，但是如果你對細胞粗暴一點，偷懶一次，它就會不開心，分分鐘給你難堪，讓你痛心疾首。還有一些小伙伴表示，沒有遇到過細胞污染的人多半是沒有養過多少細胞，然而遇到污染不能快速辨別及時處理的也肯定不是“老司機”。滴滴滴，老司機上路了，帶你拯救這些磨人的小妖精們。常見的細胞污染類型，如細菌污染，真菌污染，支原體污染，病毒污染，黑膠蟲污染，細胞株交叉污染等。眾所周知，細胞污染后最好處理方式是丟棄，重新復蘇細胞。但是如果遇到個別細胞十分珍貴無法丟棄時，我們可嘗試盡力“搶救”一下。那么問題來了，如何分辨污染源呢？確定污染類型后又該如何處理呢？
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污染類型
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常見種類
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具體表現
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污染主要來源
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細菌污染
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枯草桿菌（Bacillus Subtilis）、大腸桿菌（Escherichia Coli）、假單胞菌（Pseudomonas）、白色葡萄球菌（Staphylococcus Albus）
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細菌污染會導致培養基1~2d出現黃色或白色渾濁、顏色改變以及pH值急劇變化。
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操作不當或器材消毒不嚴；細胞培養試劑污染細菌未被檢測出來。
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真菌污染
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煙曲霉，黑曲霉，毛霉菌，孢子霉，白色念珠菌，酵母菌等
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真菌污染后短期內不會出現培養液的渾濁，培養基中會漂浮白色、淺黃色或黑色的小點，4d左右可以在高倍鏡下觀察到絲狀，管狀或者串珠狀的菌絲。
酵母菌污染，顯微鏡下常見成串的珠狀物，形態呈卵形，大約比細胞小5~10倍。當其進行出芽生殖時，會聚集成連體結構。
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實驗人員（實驗服），并且具有季節性，像長蘑菇的季節很容易感染這種菌類。
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支原體污染
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口腔支原體、發酵支原體和人型支原體（實驗人員來源）；
精氨酸支原體和無膽甾原體（血清來源）豬鼻支原體（豬來源的胰酶）
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細胞培養（特別是傳代細胞）被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養中支原體感染發生率達到63%。支原體早期污染，培養液也不渾濁。后期污染會出現培養基變色、細胞生長受抑、細胞成團、鏡下有小顆粒甚至死亡。
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實驗人員來源；
血清來源；
豬來源的胰酶；
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病毒污染
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絕大部分病毒對宿主細胞的選擇具有專一性
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一旦細胞遭受污染后顯微鏡下能明顯觀察到細胞碎片增多、腫大、圓縮、脫落等病態變形，嚴重時會在單層細胞上觀察到局部破損空斑
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可能來源于血清，胰酶及其他動物源試劑。如BSA，HSA等。
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黑膠蟲污染
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Dr.Cell 目前檢測的黑膠蟲樣本，62%為細菌，38%為支原體。
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在顯微鏡的高倍鏡下可見培養液中有小黑點狀顆粒（卵圓狀、球狀、桿狀等），并做活躍的布朗運動或原地顫動，即可大致判斷為黑膠蟲污染。
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因為目前科學界對于黑膠蟲并無準確定論，因此主要來源也無法進行斷論。根據Dr.Cell檢測的黑膠蟲樣本可以看出，黑膠蟲的來源是多樣性的，試劑，耗材，人為等都有可能。
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細胞株交叉污染
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目前，世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染，致使許多實驗宣告無效。據統計約30%細胞系被交叉污染或錯誤辨識。
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近年NIH、ATCC、Nature和Science等多次發出呼吁，要求研究者對細胞進行鑒定，NIH等權威機構也將細胞系鑒定作為基金申請的前提條件。
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細胞株的交叉污染，常因不經意的實驗疏忽（不同細胞株分盤時，共享一瓶培養基；槍頭、移液管忘記更換；）實驗操作人員錄入錯誤細胞株名稱；傳代時的培養皿；冷凍細胞時的凍存管）而發生，繼而造成后續數據搜集錯誤。
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產品名稱-中文名稱
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貨號
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作用種類
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兩性霉素B，250mg/ml
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03-028-1B
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真菌，酵母菌和霉菌
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兩性霉素B，2500mg/ml
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03-029-1B
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制真霉素，10000units/ml
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03-030-1C
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真菌，酵母菌和霉菌
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青鏈雙抗（青霉素-鏈霉素）
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03-031-1B
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對革蘭氏陽性菌G+，革蘭氏陰毒性G-
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青鏈雙抗（青霉素-鏈霉素）10X濃縮
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03-031-5B
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青鏈霉素，制真菌素三抗
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03-032-1B
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真菌、酵母菌和霉菌、G+、G-
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青鏈霉素，兩性霉素B三抗
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03-033-1B
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真菌、酵母菌和霉菌、G+、G-
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青鏈霉素，新霉素三抗
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03-034-1B
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真菌、酵母菌和霉菌、G+、G-
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硫酸慶大霉素溶液，50mg/ml
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03-035-1B
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對革蘭氏陽性菌，革蘭氏陰性菌，支原體
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卡那霉素溶液，10mg/ml
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03-049-1B
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對革蘭氏陽性菌，革蘭氏陰性菌，支原體
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判斷為真菌污染
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產品名稱-中文名稱
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貨號
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作用種類
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|
兩性霉素B，250mg/ml
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03-028-1B
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真菌，酵母菌和霉菌
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|
兩性霉素B，2500mg/ml
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03-029-1B
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|
制真霉素，10000units/ml
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03-030-1C
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真菌，酵母菌和霉菌
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青鏈雙抗（青霉素-鏈霉素）
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03-031-1B
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對革蘭氏陽性菌G+，革蘭氏陰毒性G-
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青鏈雙抗（青霉素-鏈霉素）10X濃縮
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03-031-5B
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青鏈霉素，制真菌素三抗
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03-032-1B
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真菌、酵母菌和霉菌、G+、G-
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青鏈霉素，兩性霉素B三抗
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03-033-1B
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真菌、酵母菌和霉菌、G+、G-
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青鏈霉素，新霉素三抗
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03-034-1B
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真菌、酵母菌和霉菌、G+、G-
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硫酸慶大霉素溶液，50mg/ml
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03-035-1B
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對革蘭氏陽性菌，革蘭氏陰性菌，支原體
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卡那霉素溶液，10mg/ml
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03-049-1B
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對革蘭氏陽性菌，革蘭氏陰性菌，支原體
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判斷為支原體污染
檢測
可先進行PCR檢測以確定是否為支原體污染。清除
使用支原體清除試劑。處理試劑依推薦的濃度使用，可去除90%以上實驗室常見的支原體污染（無單一試劑能100%去除支原體污染），沒有發現細胞毒性，處理方法非常便捷。
預防大于治療，使用生物安全柜前用支原體預防噴霧噴灑一次臺面，CO2培養箱每兩周一次噴灑消毒。
支原體處理方案：
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中文名稱
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貨號
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備注
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支原體污染檢測試劑盒
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20-700-20
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支原體污染處理試劑
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03-036-1B/C
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? |
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03-037-1B/C
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? |
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03-038-1B/C
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? |
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支原體、細菌、真菌污染預防噴霧劑
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IC-110100
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? |
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支原體預防試劑
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01-867-1B
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100ml，有效消毒二氧化碳培養箱中的水盤
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01-916-1E
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50ml，有效消毒任何形式的水浴環境
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判斷為病毒污染
選用輻照血清以避免任何活的微生物進入培養體系。
判斷為黑膠蟲污染
☆?溫馨提示，至少每半年一次進行細胞鑒定，理想情況每2-3個月鑒定一次，且課題開展前最好先確認使用的細胞身份。
??
最后給科研黨的一點小建議
細胞污染起因無數，最為主要的原因還是操作方法不當，
超凈臺（生物安全柜）里的滅菌槍頭拿出外頭使用，又放回超凈臺，或是雙手未經酒精殺菌消毒，操作期間觸碰到培養瓶口或是在培養皿上揮過導致灰塵細菌掉落而后才是培養環境不佳，培養箱水盆未定時清潔擦拭，培養基、緩沖液未適當封口保存等。
因此，回歸問題根本，預防勝于治療，操作員應重視所有防止污染的操作流程，才是最有效且0成本的預防。
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