?mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix (with UDG)
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| mTTx DNA/RNA聚合酶為對TTx聚合酶進行電子重構架，改變了TTx的活性配體中心，使其在Mg2+條件下仍然具有極強的逆轉錄活性。mTTx DNA/RNA Polymerase在Mg2+條件下對于DNA模板和RNA模板擴增能力幾乎無偏差，這種獨有的特性使得mTTx不再受限于反應Buffer系統，增加了其應用的拓展性，使得多種類型的實驗得以實現，包括：采用單酶進行TaqMan RT-PCR、在單管相同的Buffer系統中對RNA和DNA進行多重檢測、超多重的RNA模板擴增、RNA的NGS建庫、高保真RT-PCR擴增等。 mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix(with UDG)中dTTP大部分被dUTP替代，因此擴增產物帶有dUTP堿基，在配合熱敏UDG（該酶在92℃熱變性5min后不可逆失活，不影響后續PCR反應）消化的情況下，可有效降低氣溶膠污染現象；在105?copies污染物的測試條件下，Ct推遲12個以上（污染去除能力>99.98%），因此該qPCR Mastermix在一步法qPCR反應中具有良好的去除核酸氣溶膠污染的能力。 |
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主要特征 |
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單位定義 |
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| 一個活力單位即在在68°C條件下，30分鐘內催化10 nmol dNTP的摻入反應成為酸不溶性物質所需的酶量。 | |||||||||||||||||||||||||
儲存 |
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| -20℃可保存3年，避免反復凍融。 | |||||||||||||||||||||||||
實例展示 |
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| 1.首先使用含dUTP的mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix擴增三種基因產物（GAPDH,AFSV P72,Covid-19 N Gene），然后以105拷貝的含U產物作為模板,分別用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix（with UDG）和mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix進行擴增，反應結束后統計兩組之間的△Ct，結果為：這三個基因的△Ct值分別為12.3、13.4、12.9；△Ct值越大說明去除殘留產物的效率越高，表明該mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix（with UDG）具有良好的去除殘留模板的能力。 | |||||||||||||||||||||||||
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| 2. 以2019新冠病毒N基因體外轉錄RNA直接作為模板，應用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix對不同拷貝的目標RNA進行TaqMan qPCR擴增，結果表明不同拷貝數的RNA，擴增性能良好。 | |||||||||||||||||||||||||
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| 3. 應用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix對不同拷貝的目標DNA和RNA進行TaqMan qPCR擴增，結果表明該產品對DNA模板和RNA模板擴增幾乎無偏差，RNA模板比DNA模板更容易檢出。 | |||||||||||||||||||||||||
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| 4.將不同數量的Jurkat細胞直接加入到TaqMan PCR反應體系中，應用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix進行內參基因GAPDH的TaqMan qPCR擴增。 | |||||||||||||||||||||||||
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