藻紅蛋白（R-phycoerythrin ,R-PE）是從紅藻中分離提純的一種熒光蛋白，最大激發(fā)波長(zhǎng)為565nm，最大熒光發(fā)射峰為575nm。由于其吸光度和熒光量產(chǎn)率很高，熒光強(qiáng)而穩(wěn)定，靈敏度高備受免疫檢測(cè)標(biāo)記領(lǐng)域青睞。R-PE蛋白的亞基組成為（αβ）6γ，每個(gè)α、β亞基分子量為20KDa，每個(gè)γ亞基分子量為30KDa,總分子量為240kDa。目前還沒(méi)有辦法通過(guò)重組蛋白表達(dá)量產(chǎn)，只能從紅藻中提取，因此其生產(chǎn)成本制約其廣泛使用。
藻紅蛋白標(biāo)記抗體
1）取待標(biāo)記抗體（純度>90%），用標(biāo)記緩沖液調(diào)整濃度到 5mg/ml左右為宜，按照每mg抗體加入2μl 抗體修飾試劑，輕輕混勻，在室溫下避光晃動(dòng)反應(yīng) 90分鐘；
2）反應(yīng)完畢后，將其轉(zhuǎn)入30KMWCO超濾管，用標(biāo)記緩沖液超濾3次（每次管芯殘留液體不超過(guò)原始液量1/4），得到修飾抗體；
2.活化R-PE蛋白與抗體偶聯(lián)
1）用標(biāo)記緩沖液復(fù)溶活化R-PE蛋白，濃度調(diào)整為5mg/ml；
2）將修飾抗體與活化R-PE蛋白，按照質(zhì)量比1:3比例（每mg修飾抗體對(duì)應(yīng)3mg活化R-PE蛋白）混合，室溫避光反應(yīng)2小時(shí)；
3）將封閉試劑管中加入5ul DMSO,；按照每0.5mg抗體5ul比例用量加入步驟2）反應(yīng)產(chǎn)物中，封閉未反應(yīng)完的活性基團(tuán)；
4）標(biāo)記好的抗體分裝，加入適當(dāng)保護(hù)劑，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
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貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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ARL0022K-1 |
藻紅蛋白抗體快速標(biāo)記試劑盒 |
0.5mg |