藻紅蛋白(R-phycoerythrin ,R-PE)是從紅藻中分離提純的一種熒光蛋白,最大激發波長為565nm,最大熒光發射峰為575nm。由于其吸光度和熒光量產率很高,熒光強而穩定,靈敏度高備受免疫檢測標記領域青睞。R-PE蛋白的亞基組成為(αβ)6γ,每個α、β亞基分子量為20KDa,每個γ亞基分子量為30KDa,總分子量為240kDa。目前還沒有辦法通過重組蛋白表達量產,只能從紅藻中提取,因此其生產成本制約其廣泛使用。
藻紅蛋白標記抗體
1)取待標記抗體(純度>90%),用標記緩沖液調整濃度到 5mg/ml左右為宜,按照每mg抗體加入2μl 抗體修飾試劑,輕輕混勻,在室溫下避光晃動反應 90分鐘;
2)反應完畢后,將其轉入30KMWCO超濾管,用標記緩沖液超濾3次(每次管芯殘留液體不超過原始液量1/4),得到修飾抗體;
2.活化R-PE蛋白與抗體偶聯
1)用標記緩沖液復溶活化R-PE蛋白,濃度調整為5mg/ml;
2)將修飾抗體與活化R-PE蛋白,按照質量比1:3比例(每mg修飾抗體對應3mg活化R-PE蛋白)混合,室溫避光反應2小時;
3)將封閉試劑管中加入5ul DMSO,;按照每0.5mg抗體5ul比例用量加入步驟2)反應產物中,封閉未反應完的活性基團;
4)標記好的抗體分裝,加入適當保護劑,-20℃保存備用。
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貨號 |
產品名稱 |
規格 |
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ARL0022K-1 |
藻紅蛋白抗體快速標記試劑盒 |
0.5mg |
