G-BioSciences公司(美國)開發(fā)上市的一種高靈敏度顯色反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒,克服了存在于蛋白溶液中實(shí)驗(yàn)室常用試劑干擾的缺點(diǎn),不同蛋白檢測(cè)誤差極小。 本檢測(cè)方法不受實(shí)驗(yàn)室常用試劑的影響,例如,還原劑、鰲合劑、去垢劑、氨、醣、離液劑、鹽、藥物、抗菌素、鈷等。 檢測(cè)分二步操作(見圖1 NI蛋白檢測(cè)法示意圖)。??? 檢測(cè)蛋白濃度時(shí),蛋白與堿性銅溶液混合;銅離子結(jié)合到多肽骨架后,檢測(cè)未結(jié)合的銅離子。測(cè)定與蛋白側(cè)鏈無關(guān),使不同蛋白之間檢測(cè)誤差減少。顯色密度與蛋白的量呈反比關(guān)系。 ???? ?? 圖1? NI蛋白檢測(cè)法示意圖。將Universal protein precipitation agent (UPPA)加入蛋白溶液以便迅速沉淀總蛋白,離心使蛋白固定在管壁,把存在上清液中的干擾性物質(zhì)去除。 ? ? 緩沖液成分 1% Sarcosyl, 0.8% 2- Mercaptoethanol, 圖2? NI蛋白檢測(cè)在不同蛋白之間測(cè)定誤差小。 圖示檢測(cè)牛血清白蛋白、甲狀腺球蛋白、碳酸酐酶、細(xì)胞色素C、牛免疫球蛋白G的不同蛋白之間監(jiān)測(cè)誤差。? 在0.5-50 微克范圍內(nèi)這些蛋白呈相同的顏色和曲線,差異比例1.01。 ? ?特征 - 在蛋白質(zhì)0.5-50微克范圍內(nèi)呈線性反應(yīng) - 樣品量小,僅需1-50微升 - 不受非蛋白化合物和試劑干擾 - 操作時(shí)間 ~30分鐘 - 存放時(shí)間長,穩(wěn)定期1年 ? 應(yīng)用 - 在蛋白純化、電泳、細(xì)胞生物、分子生物等研究中測(cè)定蛋白 - 在蛋白樣品中含有常見實(shí)驗(yàn)室試劑(如還原劑2-mercaptoethanol、DTT、EDTA、去垢劑、氨、Tris、醣等)時(shí)檢測(cè)穩(wěn)定。 - 在細(xì)胞分離成分、組織細(xì)胞勻漿、色譜分析純化分離成分中測(cè)定蛋白濃度時(shí)檢測(cè)穩(wěn)定。 - 在稀釋蛋白溶液時(shí)檢測(cè)穩(wěn)定。 ? 參考文獻(xiàn) Karbarz M et al (2009) J Biol Chem 284?:414-425 Eismann T et al (2009) Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 298?:G266-G274 Xu Z et al (2009) J Cell Biol 186?: 343-353 Kalsotra A et al (2008) PNAS 105?:20333-20338 Bendezu F et al (2008) J Bacteriol 190?:1792-1811 ? ? 貨號(hào) 產(chǎn)品 規(guī)格 786-005 Non-interfering protein assay kit with albumin standard 500 assays

美國G-biosciences抗干擾蛋白測(cè)定試劑盒
作者:上海圣屹貿(mào)易有限公司生物醫(yī)學(xué)部 2011-11-11T00:00 (訪問量:9385)
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