G-BioSciences公司（美國）開發上市的一種高靈敏度顯色反應蛋白測定試劑盒，克服了存在于蛋白溶液中實驗室常用試劑干擾的缺點，不同蛋白檢測誤差極小。 本檢測方法不受實驗室常用試劑的影響，例如，還原劑、鰲合劑、去垢劑、氨、醣、離液劑、鹽、藥物、抗菌素、鈷等。 檢測分二步操作（見圖1 NI蛋白檢測法示意圖）。??? 檢測蛋白濃度時，蛋白與堿性銅溶液混合；銅離子結合到多肽骨架后，檢測未結合的銅離子。測定與蛋白側鏈無關，使不同蛋白之間檢測誤差減少。顯色密度與蛋白的量呈反比關系。 ???? ?? 圖1? NI蛋白檢測法示意圖。將Universal protein precipitation agent (UPPA)加入蛋白溶液以便迅速沉淀總蛋白，離心使蛋白固定在管壁，把存在上清液中的干擾性物質去除。 ? ? 緩沖液成分 1% Sarcosyl, 0.8% 2- Mercaptoethanol, 圖2? NI蛋白檢測在不同蛋白之間測定誤差小。 圖示檢測牛血清白蛋白、甲狀腺球蛋白、碳酸酐酶、細胞色素C、牛免疫球蛋白G的不同蛋白之間監測誤差。? 在0.5-50 微克范圍內這些蛋白呈相同的顏色和曲線，差異比例1.01。 ? ?特征 - 在蛋白質0.5-50微克范圍內呈線性反應 - 樣品量小，僅需1-50微升 - 不受非蛋白化合物和試劑干擾 - 操作時間 ~30分鐘 - 存放時間長，穩定期1年 ? 應用 - 在蛋白純化、電泳、細胞生物、分子生物等研究中測定蛋白 - 在蛋白樣品中含有常見實驗室試劑（如還原劑2-mercaptoethanol、DTT、EDTA、去垢劑、氨、Tris、醣等）時檢測穩定。 - 在細胞分離成分、組織細胞勻漿、色譜分析純化分離成分中測定蛋白濃度時檢測穩定。 - 在稀釋蛋白溶液時檢測穩定。 ? 參考文獻 Karbarz M et al (2009) J Biol Chem 284?:414-425 Eismann T et al (2009) Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 298?:G266-G274 Xu Z et al (2009) J Cell Biol 186?: 343-353 Kalsotra A et al (2008) PNAS 105?:20333-20338 Bendezu F et al (2008) J Bacteriol 190?:1792-1811 ? ? 貨號 產品 規格 786-005 Non-interfering protein assay kit with albumin standard 500 assays
美國G-biosciences抗干擾蛋白測定試劑盒
作者：上海圣屹貿易有限公司生物醫學部 2011-11-11T00:00 (訪問量:8498)
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