花燭屬親緣關(guān)系分析與細(xì)菌性枯萎病的檢測
【摘要】：花燭屬植物(Anthurium)是天南星科重要的觀賞植物,品種的鑒別、親本的選擇、優(yōu)良雜交組合選配對于花燭屬植物新品種的選育起著至關(guān)重要的作用。本研究從田間形態(tài)學(xué)和SRAP分子標(biāo)記技術(shù)兩個方面對花燭屬88個品種進行了親緣關(guān)系的分析,并篩選出2對多態(tài)性較高的SRAP引物,構(gòu)建現(xiàn)有花燭屬88個品種的指紋圖譜。另外,根據(jù)基因庫中已發(fā)表的花燭屬細(xì)菌性枯萎病致病菌粉黛單黃胞桿菌基因序列設(shè)計引物,通過對擴增條件進行優(yōu)化,建立了花燭屬細(xì)菌性枯萎病的Nested-PCR檢測方法,利用該方法對組培苗和成品植株進行檢測,對于今后篩選親本、進行抗病性育種的工作具有深遠(yuǎn)意義。主要結(jié)果如下: 1.對花燭屬88個品種的54個形態(tài)學(xué)性狀進行鑒定和分析,其平均變異系數(shù)0.36,佛焰苞復(fù)色方式的變異系數(shù)最高,為1.50,花瓣異化的變異系數(shù)最小,為0.05。基于形態(tài)數(shù)據(jù)的聚類分析,花燭屬88個品種被分為7大類群。 2.利用21對SRAP引物對花燭屬88個品種進行擴增,共擴增293條多態(tài)性條帶,平均多態(tài)帶百分率為99%,平均多態(tài)性條帶為13.95。 3.本研究選擇2對擴增譜帶穩(wěn)定性好、分辨率高的引物,把88個品種區(qū)別開來,構(gòu)建了供試花燭屬88個品種SRAP指紋圖譜。2對引物共獲得31個等位位點,記錄了2728個條帶。 4.基于SRAP分析的聚類結(jié)果顯示,本試驗供試花燭屬品種遺傳距離為0.08-0.82,各供試材料在聚類分析圖中的位置與佛焰苞顏色、佛焰苞大小和植株高度相關(guān),88份材料被分為3個類群,同一公司培育的品種基本上聚在一類。 5.試驗所用Nested-PCR方法可以直接從感染細(xì)菌性枯萎病的花燭屬組織DNA中擴增出1條343 bp的特異性條帶,該條帶與GenBank登錄的Xanthomonas.campestris pv.dieffenbachiae序列X70380.1同源性在99%以上。在整個植株中都檢測到了X.campestris pv.dieffenbachiae的特異性條帶,其中老葉的葉柄DNA擴增強度最高,根莖連接處、老葉、嫩葉柄、嫩葉、佛焰苞柄擴增強度次之,在根、佛焰苞和花序中擴增最弱。