花燭屬親緣關系分析與細菌性枯萎病的檢測
【摘要】：花燭屬植物(Anthurium)是天南星科重要的觀賞植物,品種的鑒別、親本的選擇、優良雜交組合選配對于花燭屬植物新品種的選育起著至關重要的作用。本研究從田間形態學和SRAP分子標記技術兩個方面對花燭屬88個品種進行了親緣關系的分析,并篩選出2對多態性較高的SRAP引物,構建現有花燭屬88個品種的指紋圖譜。另外,根據基因庫中已發表的花燭屬細菌性枯萎病致病菌粉黛單黃胞桿菌基因序列設計引物,通過對擴增條件進行優化,建立了花燭屬細菌性枯萎病的Nested-PCR檢測方法,利用該方法對組培苗和成品植株進行檢測,對于今后篩選親本、進行抗病性育種的工作具有深遠意義。主要結果如下: 1.對花燭屬88個品種的54個形態學性狀進行鑒定和分析,其平均變異系數0.36,佛焰苞復色方式的變異系數最高,為1.50,花瓣異化的變異系數最小,為0.05?；谛螒B數據的聚類分析,花燭屬88個品種被分為7大類群。 2.利用21對SRAP引物對花燭屬88個品種進行擴增,共擴增293條多態性條帶,平均多態帶百分率為99%,平均多態性條帶為13.95。 3.本研究選擇2對擴增譜帶穩定性好、分辨率高的引物,把88個品種區別開來,構建了供試花燭屬88個品種SRAP指紋圖譜。2對引物共獲得31個等位位點,記錄了2728個條帶。 4.基于SRAP分析的聚類結果顯示,本試驗供試花燭屬品種遺傳距離為0.08-0.82,各供試材料在聚類分析圖中的位置與佛焰苞顏色、佛焰苞大小和植株高度相關,88份材料被分為3個類群,同一公司培育的品種基本上聚在一類。 5.試驗所用Nested-PCR方法可以直接從感染細菌性枯萎病的花燭屬組織DNA中擴增出1條343 bp的特異性條帶,該條帶與GenBank登錄的Xanthomonas.campestris pv.dieffenbachiae序列X70380.1同源性在99%以上。在整個植株中都檢測到了X.campestris pv.dieffenbachiae的特異性條帶,其中老葉的葉柄DNA擴增強度最高,根莖連接處、老葉、嫩葉柄、嫩葉、佛焰苞柄擴增強度次之,在根、佛焰苞和花序中擴增最弱。