抗體可以通過不同的化學試劑交聯到酶（辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、β-半乳糖苷酶）、熒光染料（FITC、PE、APC等）、生物素（Biotin）、膠體金等?？贵w標記HRP最為經典的方法為NaIO4氧化法，先將HRP糖基氧化成醛基，醛基與抗體的-NH2反應生成希夫氏堿反應，抗體分子與HRP分子形成穩定結構。標記的時候一般按照抗體分子與HRP分子摩爾比1:4的比例進行標記，此時,兩者的質量約為1:1。
1. 抗體/蛋白的HRP標記（NaIO4氧化法）
標記以2mg抗體為例。
1.1 抗體/蛋白的處理
待標記抗體/蛋白在50mM碳酸鹽緩沖液 (0.015M Na2CO3，0.035M NaHCO3，pH9.6) 中透析，其間換液2次，抗體/蛋白濃度調整為2mg/ml；或者將高濃度的抗體用0.5M碳酸鹽緩沖液(0.15M Na2CO3,0.35M NaHCO3 ,pH9.6)稀釋到2mg/ml，如果原抗體/蛋白溶液中含有Tris、NH4+等游離氨基的試劑，必須透析除去。
1.2 HRP酶的氧化
1.2.1 稱取2mg HRP干粉(Frdbio)溶于100 μL ddH2O 中。
1.2.2 稱取 NaIO4 21mg，溶于1 mL的ddH2O中，吸取100μL NaIO4溶液與100μL的HRP溶液緩慢混合，4℃下靜置 30min，此時溶液為綠色。
（注意：此后的操作均在避光條件下進行。）
1.2.3 吸?。拨蘈乙二醇緩慢加入氧化后的HRP溶液，室溫避光靜置 30min，此時溶液為褐色。
1.3 抗體的標記
1.3.1 將氧化好的HRP溶液直接加入到已處理好的抗體/蛋白溶液中，室溫反應２h。
1.3.2 稱取0.4mg的NaBH4，溶解于20μL的 ddH2O中，全部加入上步反應液中，4℃靜置 2h，每30min搖動一次。
1.3.3 PBS(pH7.2)透析過夜，標記液中加入體積比30%～50%的甘油，混勻后置于-20℃保存。
2. 抗體/蛋白的HRP標記（戊二醛法）
參照多肽與載體偶聯相關“三種不同多肽與載體偶聯的方式——Frdbio GA(Glutaraldehyde,戊二醛)介導多肽與載體偶聯”。