在研磨幼豬內臟組織實驗中 你有遇到過這些問題嗎？-商家動態-資訊-生物在線

在研磨幼豬內臟組織實驗中 你有遇到過這些問題嗎？

作者：北京昊諾斯科技有限公司 2016-10-21T16:33 (訪問量:6203)

在研磨幼豬內臟組織實驗中 你有遇到過這些問題嗎？

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本期昊諾斯第14期組織研磨和樣品處理分享、討論，我們給大家分享的內容是——研磨幼豬內臟組織測藥物代謝，邀請到了昊諾斯銷售經理給大家做分享。
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那接下來，就讓我們先睹為快，看看這個案例的情況。
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實驗前樣品準備
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實驗：研磨幼豬內臟組織測藥物代謝
試驗樣品：幼豬心、肝、脾、肺、腎、腦6個部位的組織
實驗目的：藥物代謝測定分析
實驗步驟：
1、取出置于冰箱內的幼豬心、肝、脾、肺、腎、腦組織樣品略解凍，每個部位的樣品各取2份為一組對照，切成小塊后分別置于離心管內，編號并放進冰盒中；
2、每次研磨將以對照組為單位進行。以脾臟研磨為例：將2份脾臟組織樣品分別轉移至2個鼎昊源TL1000小型組織研磨儀配套的硬質塑料研磨管中，每管各加入不銹鋼珠1顆，其中一管加入磷酸鹽組織液，另一管加入醋酸銨組織液，蓋好管蓋，安裝上機；
3、采用自動間歇研磨方法，組織研磨儀轉速適當，設置循環，組織研磨儀研磨完成后用吸管轉移回之前對應編號的離心管中；
4、由于各內臟組織樣品的韌性不同，針對肝和腦組織的研磨，采用僅一次研磨的方法，使研磨時間被縮短，但組織研磨儀研磨效果仍然很好；針對心臟組織的研磨，采用了鼎昊源TL1000小型組織研磨儀配套的不銹鋼研磨罐，使研磨更加勻細。
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實驗結果：
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A.磷酸鹽組織液
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B.醋酸銨組織液
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C.最終結果圖

此外，我們的分享嘉賓還跟群內用戶進行了激烈的分享、討論，讓我們一同來看看擦出了怎樣的火花吧！
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昊諾斯嘉賓：大家好，今天本次討論的主講在上海展會，所以由我來代述一下。這次的實驗樣品還是內臟組織，但實驗目的是成分的測定。
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昊諾斯嘉賓：我記得以前曾經在討論會中有相似的案例，說明目前做這類研究的實驗室還是挺多的。做這類實驗的一個共同的特點就是樣品都比較新鮮，這和做生物大分子的實驗有所不同，樣品基本保持了原有的性狀，這樣有利于代謝產物的收集和測定的準確。
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昊諾斯嘉賓：如果看過實驗報告的老師會發現，在這6種組織中心肺的研磨是稍微費力一些的，其他組織都是容易處理的，但是這類實驗雖然破碎樣品難度不大，但要求的單個樣本量卻比較大，這是為了提取到足夠的產物，所以我們在這個實驗中，用的都是5ml的研磨管，在處理量上完全滿足實驗要求。
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昊諾斯嘉賓：正如報告中所述，這次實驗用了2種緩沖液，磷酸鹽的效果好于醋酸鹽的，這可能是跟酸性強弱有關，但兩種溶液測定成分都是沒有問題的。
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用戶：只是負20℃夠嗎？發現肌肉類很少用液氮的。
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昊諾斯嘉賓：剛才提到了，這次實驗的樣本基本是新鮮的，-20℃只是暫時保存，就和超市里生鮮區的肉差不多。
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用戶：也就是說不用凍硬？這倒是我第一次見。
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昊諾斯嘉賓：我們和很多老師討論過，動物類的樣本，特別是新鮮的，凍液氮會適得其反。
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用戶：哦，我只做過植物的。
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昊諾斯嘉賓：因為里面的水分太多了，液氮無法使其徹底脫水，反而會結很硬的冰。
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用戶：嗯，植物會薄很多，表面積比體積比大，去水快。
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昊諾斯嘉賓：是，也分情況。前兩天碰到一個做蘋果的老師，他也是凍液氮，結果一小塊蘋果凍得跟鋼珠似得，反而也不好研磨了，后來干脆直接磨，磨好了。
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用戶：應該切片，而不是塊，或許好些。
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昊諾斯嘉賓：對，但這個老師的樣品是從-80℃冰箱里直接拿出來的，采集時切的小塊，他也是怕溫度變化影響結果，所以才又沒切又加液氮。
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用戶：可能是怕氧化。
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昊諾斯嘉賓：他做的是DNA，只要不太高的溫度都沒問題，而且這種從-80℃冰箱里拿出來的樣本，目前最多采用的是加緩沖液研磨，特別是動物樣品。
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用戶：加緩沖液是為了保護？
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昊諾斯嘉賓：一來有助于保護樣本，二來是幫助化凍，還有的好處就是有利于均勻。
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用戶：嗯，液體容易混合均勻。
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用戶：這兩種緩沖液有何區別？
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