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南京BPIT大會|和元生物首次公開基于百億級豐度的AAV突變庫篩選系統

作者:和元生物技術(上海)股份有限公司 2021-05-27T15:25 (訪問量:5607)

2020年7月20日,在醫麥客舉辦的2020 BPIT生物創新技術大會上,和元首次對外公布了基于百億級豐度的AAV突變庫篩選系統:AAVneOTM system?;通過對AAV的改造和篩選,優化AAV生產效率,提升產量,提高純度,降低用量 ,降低免疫原性,提升感染能力,提升藥物靶向能力, 為發現更高效的病毒載體提供可能。

腺相關病毒,簡稱AAV,是一種高效、安全的體外及體內基因轉導工具。尤其在整體水平研究上,與其他病毒工具載體相比,AAV具有感染過程溫和和長效表達能力,因此成為基因操作的利器。


根據衣殼蛋白的蛋白結構和所結合的細胞外受體分子的不同,AAV可以分為數十種血清型。每種血清型的AAV組織感染嗜親性各不相同,表現出一定的器官靶向特異性。由于目前常用的AAV外殼具有趨向性,導致其使用受到了限制,因此我們需要尋找新的AAV衣殼(AAV血清型突變體)。


目前,用于篩選AAV血清型突變體的方法有以下四種:

  1. DNA重組和隨機突變(包括DNA shuffling 和采用易錯PCR的方法來獲得)
  2. 從自然界中挖掘
  3. 肽段插入(在cap區域隨機的加入一段氨基酸序列)
  4. 基于計算機的溯源性模擬設計。

和元AAVneOTM system?是基于肽段插入的方式篩選AAV的突變庫:


篩選方法:

技術優勢:

  • 插入片段采用最新的合成技術, 提高庫的構建效率,提升篩選效率 ;
  • 載體深度優化,得率更高 ;
  • 自研Cre小鼠實驗平臺,快速開展體內篩選和驗證 ,非人靈長類動物和類器官應用,全方位提高篩選精度 ;
  • 文庫涵蓋多種血清型的插入序列的隨機組合;
  • 全方位工藝優化,提升AAV產率和純度;

庫的應用

  1. 篩選高特異性嗜性的新AAV載體,靶向肝臟、心臟、中樞神經系統等基因治療熱門領域;
  2. 篩選新的低免疫原性的AAV載體;
  3. 提高AAV感染效率;
  4. 提高AAV包裝效率;

歡迎感興趣的老師前來洽談合作

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