于是我給出建議：“每個基因片段分別構建攜帶3個蛋白載體標簽的表達載體，常見的就見的促表達標簽TrxA標簽，MBP標簽和GST標簽。”
博士愣了一下，之前可能接觸這方面的工作不多。有點不好意思地說：“你剛才說的那幾個標簽我沒有記下來！，我加你微信你發給我”
“你先把我說的記下來，我再加你微信！”我撩了他一下。
博士不說話了，我怕把他撩尷尬了，我說：“逗你玩的，你加我微信，我發給你！”
我又問道：“密碼子優化了沒有？”
博士說：“優化了！”
我繼續解釋道：“一般分子量在25-70kDa經過密碼子優化的蛋白在大腸桿菌中相對容易表達，但是讓它自己獨立完成表達通常不太容易，非要有人領進門，常用的載體促溶蛋白標簽有TrxA標簽，Map標簽和GST標簽。他們對應的載體分別是TrxA標簽（pET-32a）MBP標簽（ pMal-c2x）,GST標簽（pET-41a(或者pGEX-4T-1)）。”
“構建好這些表達載體，同時分別轉化大腸桿菌BL21(DE3),誘導表達，擇優選取用于蛋白純化。”我補充道。
“如果你實在不喜歡標簽蛋白，在后續想辦法把它切掉；不想切或者不方便切的，在做實驗的時候用標簽蛋白做個對照。”我繼續補充。
這劑藥方基本可以解決目前的癥狀，我最后又補充了一句
“做完這些，如果還有問題再聯系我！”
其實，我還想說的是表達成功只是萬里長征第一步，純化才是真正的 ' 修羅場 '。最磨人的不是 ' 表達不出 '，而是 ' 看得見卻摸不著 '—— 等你走到那步，咱們再細聊蛋白純化的彎彎繞繞。
最后，我還是忍住了沒說，不能嚇唬小孩子。
掛掉電話，我看了一眼辦公桌上的蛋白電泳膠。每個做蛋白表達的人，大概都要經歷這樣的 "望聞問切"—— 用經驗當聽診器，在載體與菌株的組合中，為蛋白找到最合適的 "表達棲息地"。
