?T7 ARCA加帽加尾 mRNA合成試劑盒
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| 大多數真核mRNA的高效翻譯需要在5’末端有一個7-甲基鳥苷帽結構、3’末端有一個Poly(A)尾。T7 ARCA加帽加尾RNA合成試劑盒可以快速的體外合成帶帽帶尾的mRNA。T7 RNA聚合酶通過轉錄，將抗-反向帽類似物（ARCA）加到mRNA上。經DNase I短暫溫育可以去除模板DNA，并在Poly(A)聚合酶的作用下，為加帽的mRNA加Poly(A)尾。利用該試劑盒得到的RNA適用于多種下游應用，如RNA結構和功能研究、核酸酶生物化學研究、RNase保護分析探針、印跡雜交、反義RNA及RNAi實驗、微陣列分析、顯微注射、體外翻譯和RNA疫苗等。 T7 RNA聚合酶識別T7 promoter（TTCTAATACGA CTCACTATAGG）以-2位G堿基為起點開始轉錄，該試劑盒可以從少量樣本得到高效轉錄，單次反應可獲得>30 μg的mRNA產物，轉錄長度可達4000nt以上。轉錄產物80%以上含有7-甲基鳥苷帽結構、Poly(A)尾長度>80nt。 |
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組份 |
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原理 |
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儲存 |
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| -20℃可保存2年，避免反復凍融。 | ||||||||||||||||||||||||
實例 |
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| 以PCR產物作為模板進行體外轉錄獲得的RNA，應用 T7 ARCA加帽加尾mRNA合成試劑盒進行加帽加尾，如圖：泳道1為體外轉錄獲得的RNA，泳道2為加帽加尾后產物。 ? |
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