單抗融合無憂套裝
產品貨號:MAC0001 保存條件:按照各組分保存條件來儲存
1.產品介紹
福因德科技多年從事單抗研發,對于單抗融合篩選有著豐富的經驗.單抗研發成功基礎在于試劑選擇正確。福因德科技專
門配置了一個“單抗制備融合無憂套裝”,可保證您輕松完成細胞融合,得到細胞集落。
本產品為單抗制備融合無憂套裝,用于細胞融合及篩選,大大提高融合效率及細胞陽性率,使用者需要具備一定的細胞操作技能和免疫學知識。
2.產品組份:
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產品 |
貨號 |
規格 |
儲存條件 |
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不完全培養基 |
MAC0016 |
500ml |
2-8℃ |
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融合專用血清 |
MAC0010 |
500ml |
-20℃ |
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融合劑 |
MAC0011 |
5*1ml |
2-8℃ |
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SP2/0 |
MAC0022 |
1支 |
-80℃ |
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HAT |
MAC0013 |
10ml |
-20℃ |
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HT |
MAC0012 |
10ml |
-20℃ |
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細胞培養板 |
-- |
10塊 |
RT |
3.使用方法:
1. 試劑準備
提前將不完全培養基、融合專用血清、HT/HAT 試劑置于室溫融化,避免反復凍融。
SP2/0 細胞從 - 80℃取出,37℃水浴快速復蘇,用不完全培養基洗滌 2 次,調整細胞密度至 1×10? cells/mL。
2. 免疫脾細胞制備
取免疫合格小鼠,無菌取脾,研磨過濾制成單細胞懸液,不完全培養基洗滌 2 次,調整密度至 1×10? cells/mL。
3. 細胞融合(PEG 法)
按脾細胞:SP2/0=5:1比例混合,1500 rpm 離心 5 min,棄上清。
輕彈管底使細胞松散,37℃水浴下1 min 內緩慢滴加 1 mL 融合劑(PEG1450),邊滴邊輕搖。
靜置 1 min,逐步加入不完全培養基終止反應,離心洗滌 2 次。
4. 篩選與培養
用含20% 融合專用血清 + 1×HAT的不完全培養基重懸細胞,調整密度至 2×10? cells/mL。
接種至 96 孔板,37℃、5% CO?培養。
第 3–5 天換液(1×HAT 培養基),第 7–10 天可見克??;隨后換1×HT 培養基維持培養,待克隆長至孔底 1/3 時,檢測抗體陽性并亞克隆。
注意事項:
1.使用前請查看瓶身確認試劑是否在有效期內;
2.本套裝應按照各組份儲存條件來儲存,若不按照各儲存條件來存儲,由此帶來的試劑損壞及其他問題,售后不負責處理;
3.本套裝提供的試劑都經除菌過濾,實驗過程中自配試劑一定要確保準確,無污染,因污染問題,售后不負責處理;
4. 安全:試驗中請穿著實驗服并帶乳膠手套做好防護和消毒工作。特別是血清和SP2/0或者其他體液樣品時,請按國家生物試驗室安全防護條例執行。
特別提示:
不具備細胞培養基礎知識的操作人員建議不要獨立完成此類實驗或類似實驗,因為可能會給您帶來錯誤的結果和不必要的損失。
*本試劑僅供實驗室研究使用
