產品簡介：
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細胞增殖與活性檢測試劑盒是一種基于SST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽SST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)，SST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜（formazan，參考圖1)。SST-8 被細胞內脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養基中。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。
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圖1：SST-8分子結構及檢測原理
本試劑盒提供了一種靈敏度高，操作簡便，使用安全的細胞增殖與活性檢測方法。與傳統的MTT實驗相比具有明顯的優勢：
1.MTT實驗生成的甲臜不是水溶性的，需要使用DMSO等有機溶劑溶解；而本方法產生的甲臜是水溶性的，不僅省去了溶解步驟，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差。
2.與MTT方法相比，本方法線性范圍更寬，靈敏度更高。
3.本方法對細胞無毒性，可以多次測定，選取最佳測定時間。
4.本方法所用試劑在培養基中比MTT更加穩定，實驗結果重復性好。
5.MTT具有毒性，同時其生成的甲臜需要有機溶劑溶解，會對操作人員身體造成危害。本試劑無毒，使用中無需有機溶劑，操作更加安全。
6.本試劑盒在4°C避光可長期保存，使用無需配制，即開即用。
本試劑盒可以用于生物活性因子的活性檢測，抗腫瘤藥物的篩選，細胞增殖的測定，細胞毒性檢測以及藥敏等與細胞活性和增殖相關的實驗。本試劑盒使用方便，試劑盒包含一管已經配制好的含有SST-8的CCK-8溶液，即開即用，無需其他準備步驟。檢測過程也無需采用額外的步驟去溶解甲臜，可直接使用96孔板或者384孔板在酶標儀上檢測，適合大規模，高通量的樣品檢測。
包裝清單：
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產品編號 |
規格 |
包裝 |
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35000 |
100個測試 |
1 mL |
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35001 |
500個測試 |
5 mL |
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35002 |
1000個測試 |
10 mL |
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35003 |
3000個測試 |
30 mL |
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35004 |
10000個測試 |
100 mL |
保存條件：
CCK-8溶液在避光，0-5°C的條件下可以保存一年，如長期保存，可在-20°C下避光保存2年，如需經常使用請將試劑存放在0-5°C，為防止背景值增加干擾實驗結果，請勿反復凍融。
使用方法（以 96 孔板為例，其他規格培養板按實際情況安排）：
?? 1.在96 孔板中配置100μL的細胞懸液（通常細胞增殖實驗每孔加入100μL2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100μL5000個細胞。具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等因素決定)。按照實驗需要，進行培養（在37°C，5% CO2的條件下）預培養24 小時。
?? 2.向培養板加入1-10μL 不同濃度的待測藥物刺激。
?? 3.將培養板在培養箱孵育一段適當的時間（例如：6、12、24 或48 小時）。