如何10min完成細胞活力檢測 如何快速精確的檢測細胞活力,科研人員一直在探尋新的檢測手段。ATP 是細胞內最重要的能量分子,可以用來衡量細胞新陳代謝水平并與活細胞數目具有良好的線性關系,可通過ATP 含量反應活細胞的數目。本試劑盒是借助ATP 依賴的熒光素酶催化的熒光素發光反應,通過化學發光信號測定細胞內ATP 含量,從而檢測細胞活力或定量檢測活細胞數目并且具有靈敏度高、線性范圍寬,適合高通量篩選檢測。

圖:ATP Luminescent檢測原理圖
表:不同細胞活力檢測方法的優劣對比
|
方法 |
甲?水溶性 |
靈敏度 |
檢測時間 |
檢測指標 |
細胞毒性 |
試劑穩定性 |
高通量檢測 |
使用便捷度 |
|
MTT法 |
差 |
++ |
較長 |
A560-600nm |
高,細胞形態消失 |
+ |
++ |
+ |
|
WST-1法 |
好 |
+++ |
較短 |
A420-480nm |
低,細胞形態不變 |
++++ |
++++ |
+++ |
|
CCK-8法 |
好 |
+++ |
較短 |
A420-480nm |
低,細胞形態不變 |
+++++ |
++++ |
++++ |
|
Calcein AM法 |
不涉及 |
++++ |
很短 |
熒光 |
低,細胞形態不變 |
++++ |
++++ |
+++++ |
|
EdU法 |
不涉及 |
+++++ |
較短 |
熒光 |
細胞被固定 |
++++ |
+++ |
++ |
|
ATP酶法 |
不涉及 |
+++++ |
極短 |
化學發光 |
細胞被裂解 |
++++ |
+++++ |
+++++ |

1、操作簡單,檢測速度快
將試劑與待測樣品按照同體積混合反應10min即可上機檢測,無需洗滌換液等步驟。

圖:ATP Luminescent試劑盒檢測流程圖
2、檢測靈敏度高,線性范圍寬
能在10~10萬個細胞范圍內測定并呈現良好的線性關系。下圖是Yeasen產品與國外P*公司同類產品對比測試。
a.線性測試


圖:對由低到高不同細胞數及不同細胞類型,均展現出極優的線性度
b.信號強度測試

圖:對于不同的檢測時間,熒光信號均強于進口品牌P公司。信號穩定性也更好。
3、穩定性好
反復凍融5次對檢測效果基本無影響、4℃保存3天對檢測效果無顯著影響、室溫保存1天,仍可保留80%以上的檢測效果、本產品即使僅保留約50%的檢測效果,仍可以滿足各種常規檢測
Q:ATP的細胞活力檢測試劑,可以在熒光顯微鏡下觀察拍照嗎?
A:不可以,該試劑盒的檢測原理是化學發光法。
Q: 試劑盒可以檢測ATP的量嗎?是否有標準品?
A: 是檢測活細胞類atp的量,與cck8類似,用酶標儀測發光值,沒有標準品。
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