如何10min完成細(xì)胞活力檢測(cè) 如何快速精確的檢測(cè)細(xì)胞活力,科研人員一直在探尋新的檢測(cè)手段。ATP 是細(xì)胞內(nèi)最重要的能量分子,可以用來(lái)衡量細(xì)胞新陳代謝水平并與活細(xì)胞數(shù)目具有良好的線性關(guān)系,可通過(guò)ATP 含量反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)目。本試劑盒是借助ATP 依賴(lài)的熒光素酶催化的熒光素發(fā)光反應(yīng),通過(guò)化學(xué)發(fā)光信號(hào)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ATP 含量,從而檢測(cè)細(xì)胞活力或定量檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)目并且具有靈敏度高、線性范圍寬,適合高通量篩選檢測(cè)。

圖:ATP Luminescent檢測(cè)原理圖
表:不同細(xì)胞活力檢測(cè)方法的優(yōu)劣對(duì)比
|
方法 |
甲?水溶性 |
靈敏度 |
檢測(cè)時(shí)間 |
檢測(cè)指標(biāo) |
細(xì)胞毒性 |
試劑穩(wěn)定性 |
高通量檢測(cè) |
使用便捷度 |
|
MTT法 |
差 |
++ |
較長(zhǎng) |
A560-600nm |
高,細(xì)胞形態(tài)消失 |
+ |
++ |
+ |
|
WST-1法 |
好 |
+++ |
較短 |
A420-480nm |
低,細(xì)胞形態(tài)不變 |
++++ |
++++ |
+++ |
|
CCK-8法 |
好 |
+++ |
較短 |
A420-480nm |
低,細(xì)胞形態(tài)不變 |
+++++ |
++++ |
++++ |
|
Calcein AM法 |
不涉及 |
++++ |
很短 |
熒光 |
低,細(xì)胞形態(tài)不變 |
++++ |
++++ |
+++++ |
|
EdU法 |
不涉及 |
+++++ |
較短 |
熒光 |
細(xì)胞被固定 |
++++ |
+++ |
++ |
|
ATP酶法 |
不涉及 |
+++++ |
極短 |
化學(xué)發(fā)光 |
細(xì)胞被裂解 |
++++ |
+++++ |
+++++ |

1、操作簡(jiǎn)單,檢測(cè)速度快
將試劑與待測(cè)樣品按照同體積混合反應(yīng)10min即可上機(jī)檢測(cè),無(wú)需洗滌換液等步驟。

圖:ATP Luminescent試劑盒檢測(cè)流程圖
2、檢測(cè)靈敏度高,線性范圍寬
能在10~10萬(wàn)個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)測(cè)定并呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。下圖是Yeasen產(chǎn)品與國(guó)外P*公司同類(lèi)產(chǎn)品對(duì)比測(cè)試。
a.線性測(cè)試


圖:對(duì)由低到高不同細(xì)胞數(shù)及不同細(xì)胞類(lèi)型,均展現(xiàn)出極優(yōu)的線性度
b.信號(hào)強(qiáng)度測(cè)試

圖:對(duì)于不同的檢測(cè)時(shí)間,熒光信號(hào)均強(qiáng)于進(jìn)口品牌P公司。信號(hào)穩(wěn)定性也更好。
3、穩(wěn)定性好
反復(fù)凍融5次對(duì)檢測(cè)效果基本無(wú)影響、4℃保存3天對(duì)檢測(cè)效果無(wú)顯著影響、室溫保存1天,仍可保留80%以上的檢測(cè)效果、本產(chǎn)品即使僅保留約50%的檢測(cè)效果,仍可以滿(mǎn)足各種常規(guī)檢測(cè)
Q:ATP的細(xì)胞活力檢測(cè)試劑,可以在熒光顯微鏡下觀察拍照嗎?
A:不可以,該試劑盒的檢測(cè)原理是化學(xué)發(fā)光法。
Q: 試劑盒可以檢測(cè)ATP的量嗎?是否有標(biāo)準(zhǔn)品?
A: 是檢測(cè)活細(xì)胞類(lèi)atp的量,與cck8類(lèi)似,用酶標(biāo)儀測(cè)發(fā)光值,沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)品。
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