近日，由中國食品藥品檢定研究院牽頭，翌圣生物科技（上海）股份有限公司深度參與合作的《Establishment of Nucleic Acid Amplification Technology for the Detection of Mycoplasma in Biological Products》研究論文正式刊發，給國內生物制品的支原體質控體系升級，帶來一份極具參考價值的權威科研成果。
作為國內生物醫藥工具酶與分子診斷試劑龍頭企業，翌圣生物深耕核酸擴增核心原料與整套檢測方案多年，擁有成熟的 qPCR、LAMP 等多平臺支原體檢測技術體系、高保真聚合酶、防污染體系以及完整方法學驗證經驗。本次與中檢院攜手開展聯合研究，雙方發揮各自優勢：中檢院立足國家藥品質量監管權威視角，把控方法合規性、通用性與評價標準；翌圣生物輸出成熟核心酶原料、配套試劑體系與大量實操驗證數據，協同完成整套生物制品支原體核酸擴增檢測方法的體系搭建、性能驗證與數據論證。
在課題研究過程中，團隊嚴格對標國內生物制品質量管控法規要求，系統性完成特異性、靈敏度、重復性、抗干擾性等全套方法學驗證。整套檢測方案穩定性強、靈敏度優異，能夠精準識別各類常見污染支原體菌株，可適配抗體藥、細胞制劑、慢病毒載體、重組蛋白、疫苗等多品類生物制品樣本檢測場景，兼顧實驗室常規質控與規模化生產在線篩查需求。
此次聯合論文的發表，意義深遠。一方面，文章形成了具備權威性、實操性的技術參考依據，填補國內生物制品核酸法支原體檢測標準化研究的實踐資料，為藥企、CDMO、檢測實驗室搭建合規檢測平臺提供清晰技術指引；另一方面，印證了國產分子試劑原料完全能夠匹配國家級權威質控研究嚴苛標準，打破高端質控試劑對外依賴的局面，夯實生物醫藥質控產業鏈自主可控根基。
自成立以來，翌圣生物始終聚焦生物醫藥上游核心工具研發，持續聯動中檢院、各大藥檢所、頭部藥企、高校研究院開展標準共建、聯合攻關。從參與團體標準制定，到攜手國家級權威機構產出高水平學術成果，企業一步步以硬核技術助力國內生物安全質控水平提升。
未來，翌圣生物將持續加碼 CGT、疫苗、細胞治療等熱門賽道質控技術迭代，打磨更高性能、全場景覆蓋的支原體、病毒、宿主 DNA 殘留等全套質控試劑方案，持續深化與國家級權威平臺、行業伙伴的產學研協同創新，以本土核心技術守護中國生物制品安全，助力我國生物醫藥產業高質量、規范化發展。
支原體污染是細胞培養、細胞治療產品、疫苗、基因藥物等生物制品生產全流程中重大安全風險點。傳統培養法檢測周期長、靈敏度有限，難以適配當下細胞與基因治療（CGT）產業高速發展下高效、精準質控的剛需。核酸擴增檢測憑借靈敏度高、速度快、通量高等優勢，已然成為行業替代傳統方法的主流方向，但標準化、可落地、適配國內監管要求的成熟檢測方案，仍是行業亟待夯實的關鍵。
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2020版中國藥典三部《生物制品生產檢定用動物細胞基質制備及質量控制》中提出對于生產用細胞，需要對主細胞庫（MCB）、工作細胞庫（WCB）、生產終末細胞（EOPC）進行支原體檢查。
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《免疫細胞治療產品藥學研究與評價技術指導原則（試行）》中建議在關鍵時間點對適合的中間樣品開展支原體等安全性相關檢測或采取相關的措施加以控制，并且支原體同樣需要作為終產品的放行檢項。
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FDA,Guidance for Industry:Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications，中提出對于原材料、病毒種子、未加工的收獲液等都需要進行支原體控制。
在快速檢測方法（NAT，核酸擴增技術）出現之前，傳統的培養法和指示細胞法因其檢測周期長或靈敏度問題，致使企業生產或產品放行周期拉長或者需要基于風險評估對細胞原料進行條件放行或者尋求其他替代方法。而隨著細胞基因治療的發展，行業內對支原體檢測時效性和靈敏度要求越來越高，短的貨架期不足以支撐如此長的檢測周期，因此NAT方法從眾多支原體檢測方法中脫穎而出。
目前歐洲藥典（EP）<2.6.7>，日本藥典（JP）以及美國藥典（USP）<63>都已收錄NAT方法作為支原體檢測方法，但需要對該方法進行驗證以及與傳統方法進行對比其檢測靈敏度不低于傳統方法，才可以使用。2020版中國藥典（ChP）雖然并未收錄NAT法作為支原體檢測方法，但其中也提到了“也可采用經國家藥品檢定機構認可的其他方法”。2022年5月，國家藥監局藥審中心發布的《免疫細胞治療產品藥學研究與評價技術指導原則（試行）》中提到“當檢驗樣品量有限，或需要快速放行等特殊情況下，如藥典方法無法滿足，可考慮開發新型的無菌和支原體的檢測方法進行放行檢測，但是新型檢測方法應經過充分驗證”。所以NAT法有望作為能夠支持快速支原體放行檢測的方法，被越來越多的原材料供應商、以及ATMP企業所使用。
翌圣生物MycAway®支原體qPCR檢測試劑盒（探針法）(2G)是基于NAT (nucleic acid amplification techniques)的一種快速定性檢測生產原料、細胞庫、病毒種子、病毒或細胞收獲液、治療用細胞中潛在支原體污染的產品。
該試劑盒基于定量PCR技術，采用多重PCR的方法，使用2種熒光探針，FAM和CY5，分別檢測目標序列和內參。該2G版本可覆蓋多達183種支原體DNA序列，還可兼容更多品牌的qPCR儀器。
同時，MycAway®支原體qPCR檢測試劑盒（探針法）(2G)也嚴格按照EP 2.6.7進行專屬性、檢測限、耐用性的全面驗證，檢測限滿足≤10 CFU/mL的要求。同時覆蓋USP、JP、WHO、ChP等中要求驗證的支原體菌株類型，試劑盒性能符合中外法規要求，助力生物醫藥客戶的藥物研發項目臨床實驗申請等的順利受理。
?? 符合法規：按照EP2.6.7、JP G3和USP 63藥典要求驗證，符合國際權威機構的標準
?? 配合審計：產品生產符合ISO13485質量體系標準，有完善的審計文件
?? 保障品質：試劑盒所需酶原料全自產，且已產業化，供貨穩定
?? 技術經驗積累：TaqMan法有技術沉淀，Kit靈敏度可達10CFU/mL及以下
?? 專注產品性能：Taq酶抗體庫，雙封閉抗體提高了Kit特異性、靈敏度、穩定性
?? 檢測種類多：優化的TaqMan探針可檢測多達183種支原體
?? 操作簡便：樣本制備和檢測總時長<3h，無需培養法的28天等待
?? 靈敏度高：檢測限達到可以替代直接培養法的10CFU/mL
?? 專屬性強：針對16s rRNA設計引物探針，不與梭菌、乳桿菌等親緣關系物種交叉反應
?? 安全性高：試劑盒內陽性對照(PC)無感染性，完全消除污染風險
?? 防干擾強：引入內部質控(IC)，可排除樣本干擾、反應配制異常等因素，有效避免假陰性
翌圣生物MycAway™支原體qPCR檢測試劑盒(探針法)能夠與MolPure®磁珠法殘留DNA樣本前處理試劑盒搭配使用，可以通過手動提取或者使用自動化核酸提取儀自動提取樣本核酸。樣本經過前處理去除干擾雜質獲得純化的支原體DNA后，通過qPCR收集探針的熒光信號，從而對檢測結果進行判定。
