膠原蛋白（Collagen）是一種高分子功能性蛋白質，也是結締組織和內臟器官外基質的主要成分，比如I型膠原在骨、跟腱、皮膚、血管壁中含量豐富；II型膠原在透明軟骨中含量豐富；III型膠原在皮膚、血管內膜、腸道中含量豐富，彈性較好。不同類型的膠原蛋白在醫療、美容、醫學和科學研究領域有著重要的應用。

其中I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成300 nm長的異源多聚體。當用作凝膠時，膠原蛋白有助于體外培養并增強細胞特異性形態和功能的表達。翌圣生物生產的I型鼠尾膠原蛋白來源于天然小鼠鼠尾巴和SD大鼠鼠尾巴，制作的膠原蛋白產品溶于0.02M HAc溶液，無菌包裝?？捎糜诒右源龠M附著，應用包括研究腫瘤細胞侵襲和遷移，單核細胞，巨噬細胞的培養或分化研究，以及粒細胞和巨噬細胞的放射自顯影研究，以及維持肝細胞功能，分化狀態和肝細胞基因轉錄水平的升高等研究。

翌圣生物提供來自于大鼠和小鼠尾的I型膠原蛋白，不僅產量足、純度高、蛋白濃度豐富，品質更佳，且經過具體的應用驗證，得到結果與預期一致。

生產質控

無塵車間內生產，保證潔凈度；

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來源小鼠和SD大鼠鼠尾巴；

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單批產量達3L，滿足大規模使用需要；

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通過細胞培養測試(包括三維膠細胞培養)；

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電泳結果蛋白濃度＞90 %（SDS-PAGE）；

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產品為無菌溶液，無支原體污染。

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應用方法

 01

薄層包被程序

【注意】：包被濃度為5-10 µg/cm2，推薦濃度可首選5 µg/cm2。建議根據具體的細胞培養系統進行優化。

1）膠原蛋白I用0.02 M乙酸稀釋配置50 μg/ mL工作液，膠原蛋白I不溶于中性pH溶液；

2）以5 µg/cm2涂布培養皿，例如：35 mm的培養皿的表面積約為10 cm2，1~2 mL的工作液足以覆蓋此皿；

3）室溫孵育1小時；

4）小心吸取剩余溶液，用PBS或無血清培養基洗滌以除去多余乙酸；

5）組織培養皿包被后可立即使用，也可風干，在2-8℃無菌條件下可貯存長達一周。

02

膠凝程序

膠原蛋白I按以下步驟使其pH達到弱堿性時凝膠

1）將無菌5 cm左右的紗布海綿貼在150 mm培養皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和，把蓋子放在150 mm的培養皿上，暫放置一邊；

2）將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上，厚度可以根據需要改變，膠原蛋白I（50-100 μL）足以涂覆22 mm的蓋玻片。對于直徑100 mm的培養皿，每個加入約6 mL; 對于60 mm培養皿添加約2.3 mL，對于35 mm培養皿添加約1 mL；

3）將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養皿轉移到氨蒸氣室并暴露三分鐘；

4）在無菌蒸餾水中（35 mm培養皿加5 mL等）浸泡涂布的蓋玻片或培養皿30 min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0 mL無菌蒸餾水，放置在層流罩中過夜；

5）吸出蒸餾水，用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。

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