國內庫來源基礎
細胞名稱 大鼠雪旺細胞；RSC-96
形態特性 神經元樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 RSC96細胞株是原代培養的大鼠雪旺細胞經長時間培養后自發轉化而成的[PubMed:9766530]。2002年十二月提交到ATCC的培養物污染了支原體。其后代通過BM細胞周期蛋白處理21天消除支原體。處理后六周，用Hoechst染色、PCR和標準培養測試進行支原體檢測。結果都呈陰性。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:6傳代；2~3天換液1次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS　

該系注意事項-備份方案參考
目的應用，超量培養、類器官上前狀態調整、超長維持培養、分化后超長時間培養
關鍵詞： T25 瓶 、 細胞培養搖勻、 DPBS(不含鈣鎂) 、成團成片（優化胰酶）、培養環境及細胞需要每日觀察、酸堿-細胞中培養基顏色觀察要仔細-問題溝通中偏黃，偏紫要描述準確，

1：建議長期做下傳統DMSO與無血清凍存比較，細工推薦DMSO,用量8% ，程序降溫建議用泡沫盒方法，統計意義，后面自動化應用、對凍存挑剔細胞（耐藥株系、原代自建系、工業戶種子細胞）、了解胰酶特點輔助凍存的用戶的來信注明（發地址聯系人，注明案例細胞名稱），復蘇后碎片過多的用戶建議參考細工傳統方案。優化胰酶消化雖然費時，可復蘇后高活率，大大節省整體實驗時間。復蘇后細胞活率還說明細胞狀態更好。
2：含血清為主，ATCC疑問討論(支原體污染過細胞）,通過黑點，生長慢優化后救助，慢培養路線，瓶培養后，避免皿-PH變化快,3-X天以上增殖的系，瓶方式能理解的用戶，應用前建議提前關注幾個重要參考排查，排查培養箱設置、培養基成分，以及培養器皿是否異常。（黑點問題不見得是污染，更多案例統計后，在公布參考）原代含血清方案，熟練實驗室及國內庫，概率都是4-7天都可順利長滿并傳代，也是我司力推含血清理由，無血清部分考慮影響因素更多，需討論可詳細先告知細節。
3：需超量雪旺細胞，分化后維持培養（或類器官應用的），更好狀態，可試試細工方案及試劑，
4：消化，雪旺壁厚，對膜要求高，細工胰酶又明顯優勢，該株轉染前、凍存前、膜片鉗等實驗使用后，避免細胞膜損傷，后面實驗會更好（建議做細工方案備份組）。常規胰酶濃度0.25消化需8-9 min以上的，細工胰酶后面培養細胞質量會有優勢明顯，MDCK、上皮、細胞壁厚細胞，成團成片，iPSC含血清方案，細工優勢在，不怕消化過，細胞膜無損，在實驗中，可同時處理幾十盤細胞，該方案應用前，自己要做預實驗，并建議用胰酶敏感細胞驗證，拿到預實驗數據，后面相關很多實驗都會用到，并是較關鍵步驟，細工在自動化培養冗余試劑開發中，試劑容錯能力，對細胞質量后期實驗目的超量，維持培養及要求高的實驗。

該細胞需特別注意:
RSC96 細胞生長形態為神經元樣長梭形形態，細胞生長至過密時細胞會變成圓形細胞，細胞生長至80%即可傳代。細胞對血清質量較為敏感。

細工不同建議與后面預實驗參考驗證：通過膠質類細胞規模培養，工業用戶對培養基成本要求高用戶，上清部分回輸可比全新完全培養基增殖明顯快，也相應減少成本費用，后面自動化培養-冗余試劑開發還有更多問題挑戰，也建議用戶做預實驗組，做備份方法。工業用戶膠質類用戶可深入討論規模培養，自動化培養、維持培養等應用。