全球疫情拐點已現，關鍵點原來是它
據倫敦時間3月6號ourworldindata的數據顯示，全球共接種約3億人次的疫苗。目前COVID-19疫苗接種至少單針劑量總量靠前的國家和地區有：美國、中國、歐盟、英國、巴西、以色列等。美國與英國分別是在當地時間2020年12月8日和14日開始接種COVID-19疫苗，截止到2021年3月6號，美國和英國已經完成8791萬人和2289萬人份的疫苗注射。通過統計發現兩個國家的新增確診人數和疫苗接種量數據可以看出，隨著疫苗的接種量增加新增確診呈現出大幅下降的趨勢[1]。
數據來源：ourworldindata
美國和英國使用最多的疫苗是Pfizer/BioNTech 和Moderna 公司基于mRNA技術平臺開發的mRNA疫苗。所使用的mRNA疫苗就是將RNA在體外進行相關的修飾后傳遞至機體細胞內表達并產生蛋白抗原，從而導機體產生針對該抗原的免疫應答，進而擴大機體的免疫能力[2,3]。mRNA疫苗是第三代的疫苗類型，是繼滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗、DNA疫苗后新型的疫苗技術路線。與其他類型的疫苗相比，mRNA疫苗具有安全、高效、生產便捷、開發周期短等優點，具有極大的發展潛力。
圖：美國使用的COVID-19疫苗制造商及占比。數據來源：ourworldindata
mRNA疫苗體外開發流程包括mRNA體外合成、修飾和純化等操作。由于RNA的不穩定性，完整的mRNA結構有利于mRNA的穩定性和表達能力。在體外合成的mRNA在添加一些基本結構元件才能達到與真核細胞mRNA相似的穩定效果，如在其蛋白編碼的開放閱讀框(ORF) 5’端添加m7GPPPN結構即7-甲基鳥苷帽子結構和3’端poly(A)尾以促進mRNA的穩定性。其中5’端加帽是重要的過程，此過程常應用酶學法加帽如牛痘病毒加帽酶（Vaccinia Capping Enzyme）。
圖：A typical mRNA construct with supporting untranslated regions, poly(A) tail, and an optional signal peptide sequence attached to the coding sequence[4]
翌圣生物作為國內分子酶產業創新領導者，通過先進的分子酶雙向技術平臺、大規模蛋白發酵純化技術平臺，提供低殘留和高效率加帽的Vaccinia Capping Enzyme（牛痘病毒加帽酶），經過GMP工藝生產獲得，完全滿足疫苗生產所需，并提供其他mRNA疫苗相關的酶和試劑。
翌圣生物GMP級別Vaccinia Capping Enzyme
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檢測項目 |
質量標準 |
檢測方法 |
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活性 |
甲基轉移酶活性≥1×104U/mL |
高效液相反相柱層析法 |
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蛋白含量 |
≥0.1mg/mL |
BCA法 |
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蛋白純度 |
≥95% |
SDS-PAGE還原膠 |
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核酸外切酶 |
陰性 |
參照內部方法 |
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切口酶 |
陰性 |
參照內部方法 |
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RNA酶 |
符合要求 |
參照內部方法 |
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細菌內毒素 |
符合要求 |
凝膠法 |
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宿主蛋白 |
陰性 |
ELISA法 |
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宿主DNA |
陰性 |
Q-PCR法 |
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無菌檢查 |
無菌生長 |
通則1101 |
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病原體檢查 |
陰性(不得檢出) |
參照內部方法 |
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支原體檢查 |
陰性(不得檢出) |
支原體檢測試劑盒 |
注：具體質檢標準及數據參考具體批次COA
加帽效率測定
質譜測定加帽酶的加帽效率，并與對照品進行對比，可以發現翌圣的加帽酶的加帽效率較高，獲得的產物的純度也較高。
殘留檢測
分別檢測Rnase、核酸酶、切口酶、大腸桿菌DNA殘留，經檢測結果顯示，成品無相關酶的殘留，且表達的宿主DNA殘留也達到了使用要求標準。
翌圣生物作為分子酶領域創新領導者，專注為您提供高品質的分子酶產品及mRNA疫苗相關試劑，為您的mRNA疫苗研究和生產開發提供更多選擇和方便。
相關產品
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產品名稱 |
貨號 |
規格 |
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UCF.METM mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-grade |
10614ES84/92 |
2000/10000U |
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UCF.METM mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase GMP-grade |
10612ES84/92 |
2000/10000U |
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UCF.METM T7 RNA Polymerase GMP-grade（1 KU/μl） |
10613ES92/97 |
10/50KU |
|
UCF.METM Murine RNase inhibitor GMP-grade |
10621ES10/20 |
10/20 KU |
|
UCF.METM Pyrophosphatase,Inorganic GMP-grade |
10620ES10/60 |
10/100U |
|
UCF.METM DNase I , RNase-free ，GMP-grade |
10611ES76/84 |
500/2000U |
|
Hifair? T7 High Yield RNA Synthesis Kit |
10623ES50/60 |
50/100T |
|
S-adenosylmethionine (SAM) |
10619ES02 |
0.5ml |
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GTP Solution(100mM) |
10132ES03 |
1ml |
|
NTP Set Solution(ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each） |
10133ES03 |
1 Set (4 vial) |
[1] https://ourworldindata.org/covid-vaccinations
[2]苗鶴凡, 郭勇, 江新香. mRNA疫苗研究進展及挑戰[J]. 免疫學雜志, 2016(05):446-449.
[3] Kramps T., Elbers K. (2017) Introduction to RNA Vaccines. In: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines. Methods in Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
[4] Versteeg L, Almutairi MM, Hotez PJ, Pollet J. Enlisting the mRNA Vaccine Platform to Combat Parasitic Infections. Vaccines (Basel). 2019;7(4):122. Published 2019 Sep 20.