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Hieff NGSTM?MaxUP II DNA Library Prep Kit
——文庫轉化率高達60%，極其適用FFPE、cfDNA樣本
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DNA?文庫構建是NGS樣本制備的核心環節。文庫質量直接影響測序數據質量——如mapping rate、coverage、complexity、bias等。要想獲得好的文庫，必須選擇好的建庫試劑盒，而建庫試劑盒的關鍵，在于其文庫轉化率，即DNA片段雙端接頭連接效率，因為只有雙端連接成功的DNA，才能夠被有效擴增最終成為測序模板。
產品特點
Hieff NGSTM?MaxUP II DNA Library Prep Kit for Illumina?，采用高質量的酶學組成，改進型接頭連接技術，以及具有強擴增效率的高保真酶，顯著提高文庫轉化率與擴增效率，助理完成更好。
??適用500 pg-1 μg所有DNA樣本
??業界**文庫轉化率，高達60%
??產品優異性能已在基因組、FFPE、cfDNA等多種樣本中驗證
??2.5小時內收獲優異文庫?，PCR或PCR-free方式均可
??全程控制原料、人員、工藝與質量，全力保障批次性能與穩定性
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1.?文庫轉化效率高達60%
文庫轉化率，即DNA片段雙端接頭連接效率。只有雙端連接成功的DNA，才能夠被有效擴增最終成為測序模板。
圖1?Agilent?2100?檢測350bp平末端DNA片段單端和雙端連接產物峰。
0：350bpDNA片段峰、1：單端接頭連接產物峰、2：雙端接頭連接產物峰。測試基于各公司的標準protocol進行。
圖2?接頭連接效率百分比（%）。
對圖1峰面積進行積分后的定量結果顯示Hieff NGS? MaxUp II Kit?的雙端連接效率可達60%。
2.?不同GC樣本，擴增效率測試
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Hieff NGS? MaxUp II Kit中使用具有強擴增效率的Super CanaceTM?High-Fidelity Mix用于文庫擴增。以1 ng GC含量分別為38%、50%、70%的400 bp DNA片段為起始樣本，12 cycles擴增，Qubit檢測不同試劑盒所得產物濃度，Super Canace表現極佳。
表1?擴增模塊效率比較。
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產品名稱 |
GC 38% (ng) |
GC 50% (ng) |
GC 70% (ng) |
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Super CanaceTM?High-Fidelity Mix |
25.6 |
18 |
17.1 |
|
K*-HiFi mix |
15.8 |
16.7 |
21.1 |
3. FFPE、cfDNA樣本,?文庫產量測試
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Hieff NGS? MaxUp II Kit以FFPE和cfDNA為起始樣本建庫，相對同類型試劑盒品牌?K*，在相同擴增循環數下，獲得更多文庫產量。
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樣本 |
100 ng FFPE |
5 ng cfDNA |
||
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7 cycles (ng) |
10 cycles (ng) |
9 cycles (ng) |
12 cycles (ng) |
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MaxUP II |
400 |
2000 |
120 |
1200 |
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K*?品牌 |
150 |
1100 |
100 |
1080 |
注：FFPE樣本來自小鼠肺蠟塊，固定時間6個月；cfDNA樣本來源于血漿。
4.?無偏好性的測序質量
在不同GC含量樣本中，使用Hieff NGS? MaxUP II Kit均能獲得堿基質量好且覆蓋度均一的測序數據。
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