翌圣ZymeEditor?精品盤點之脫氧核糖核酸酶I（DNase I）
脫氧核糖核酸酶I（Deoxyribonuclease I, DNase I），是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA的非特異性核酸內切酶。它能夠水解磷酸二酯鍵，產生含有5'-磷酸基團和3'-OH基團的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸。
DNase I最佳的工作pH范圍是7-8，其活性依賴于Ca2+，并可被二價金屬離子如Mn2+，Mg2+，Zn2+等激活。在Mg2+存在條件下，DNase I 隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；Mn2+存在條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個核苷酸突出的粘末端。
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圖1. DNase I在Mg2+以及Mn2+存在下可切割dsDNA原理圖
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翌圣DNase?I由ZymeEditor?酶改造平臺重組表達而來，無RNase殘留，酶切效率高，作用底物類型廣，可應用于體外轉錄去除模板DNA、RNA建庫中去除rRNA、RNA提取或反轉錄前去除gDNA等多個場景。
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圖2. RNase殘留檢測?C：對照
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分別使用翌圣及進口品牌T*、N*的DNase I進行體外轉錄中DNA模板去除，結果顯示翌圣DNase I的模板DNA去除效率與國際進口品牌相當。
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圖3. 體外轉錄中模板DNA去除 C：不加DNase I對照；T*：進口品牌T*；N*：進口品牌N*；M：Marker
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分別使用翌圣及進口品牌T*的DNase I進行rRNA去除，將純化后的RNA進行建庫，結果顯示翌圣與進口品牌的DNase I在進行rRNA去除后，RNA建庫產量相當。
圖4. DNase?I用于RNA建庫?T*：進口品牌T*
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為滿足不同的應用需求，翌圣可提供牛胰腺提取來源及大腸桿菌重組表達兩種來源的DNase I，并可提供GMP級別DNase I，以滿足mRNA體外轉錄等應用。
產品來源 | 產品定位 | 應用 | 產品名稱 | 產品貨號 |
牛胰腺提取 | 普通 | 主要用于從蛋白制備物中去除DNA | Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas | 10607ES |
10608ES | ||||
重組表達 | RNase Free | 適用于從RNA和蛋白制備物中去除DNA | Recombinant DNase I (RNase-free) | 10325ES |
重組表達 | GMP級, RNase Free |
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