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如何遠離外泌體研究煩惱(內附解決方案)

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2021-09-18T15:40 (訪問量:15926)

如何遠離外泌體研究煩惱(內附解決方案)

2013年,諾貝爾生理學或醫學獎授予了三位在細胞間囊泡運輸的調控機制領域做出突出貢獻的科學家,自此開啟了外泌體研究的新時代。

圖1. PubMed外泌體相關文章統計(數據來源PubMed官網).jpg

▲ 圖1. PubMed外泌體相關文章統計(數據來源PubMed官網)

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▲ 圖2. 國自然外泌體課題中標數量



外泌體為什么這么火?


01

來源


外泌體是細胞在生理或是病理狀態下分泌的直徑約為30 – 150nm的被雙層脂質膜包裹的細胞外囊泡,是由細胞中的多泡體(Multivesicular body, MVB)和細胞膜融合釋放其內部的管腔內泡(Intraluminal vesicles, ILVs)到細胞外形成的。每種細胞都會產生獨特的外泌體,具有獨特的特性和內容物。

圖3. 外泌體橫截面模式圖,內部為hsp70蛋白(來源Wikipedia).jpg

▲ 圖3. 外泌體橫截面模式圖,內部為hsp70蛋白(來源Wikipedia

02

能力


外泌體中包含其起源細胞的各種分子成分,比如蛋白質,RNA和DNA,在細胞間物運輸和信號交流中發揮著重要的作用,并且可以幫助細胞清理折疊錯誤的蛋白等細胞廢物,幫助維持細胞內環境的穩態。

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▲ 圖4. 外泌體功能和特征[1]

03

才華


外泌體因其是細胞天然產生的囊泡并具有一定的物質運輸能力,作為天然的細胞通訊系統,在體液中廣泛存在,因此在新的藥物載體開發應用上,外泌體具有毒性低,無免疫原性和滲透性好等優勢。另一方面,不同細胞產生的外泌體具有特異性,因此在疾病和腫瘤早篩中外泌體也有著巨大的潛力。



外泌體分離方法


目前外泌體的分離方法主要有以下幾種:

提取方法

優點

缺點

超速離心法

分離外泌體純度較高

操作繁瑣,耗時長

過濾離心

簡單、省時,不影響外泌體的生物活性

純度不足

密度梯度離心法

純度較高

前期準備工作繁雜

聚合物沉淀法

簡單、無需特殊設備

周期長、易沉淀非外泌體污染物

凝膠排阻法

操作簡單,分離外泌體純度高

技術難度略高,易染菌

免疫純化

保證外泌體形態的完整、特異性高、操作簡單

生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性

色譜法

得到的外泌體大小均一

設備特殊,價格高,應用不廣泛

微流控技術

產物純度高,分離速度快

技術未成熟



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