<p style="color: #3e3e3e;"><strong>純化工藝表征</strong></p> <p style="color: #3e3e3e;">純化工藝表征（Process Characterization）是通過生產工藝的系統性研究，為工藝表現和產品質量屬性提供數據支持。</p> <p style="color: #3e3e3e;">其研究目標是為了確認關鍵工藝參數（CPP，Critical Process Parameters），定義這些參數的操作范圍，在可操作接受的范圍內設置推薦的操作范圍，以保證工藝的重現性和穩定性。</p> <p style="color: #3e3e3e;">&nbsp;</p> <p style="color: #3e3e3e;">工藝表征大致流程如下圖：<img class="rich_pages wxw-img" src="https://img1.dxycdn.com/p/s14/2024/0708/929/4410951776513210181.png" width="554" height="254" border="0" /></p> <p style="color: #3e3e3e;">在具體執行中，以單步層析的關鍵工藝參數DOE實驗為例，需要對風險評估出來的關鍵參數進行測試實驗，通常采用實驗設計軟件給出實驗設計。</p> <p style="color: #3e3e3e;">&nbsp;</p> <p style="color: #3e3e3e;">下圖為層析參數魚骨圖：</p> <p style="color: #3e3e3e;"><img class="rich_pages wxw-img" src="https://img1.dxycdn.com/p/s14/2024/0708/989/8638981966513210181.png" alt="圖片" width="554" height="375" border="0" /></p> <p style="color: #3e3e3e;">以<span class="wx_search_keyword_wrap">離子交換層析</span>為例，假設通過評估篩選出CPP 4項，分別為樣品及結合ph、流速/保留時間、平衡液鹽濃度及洗脫液鹽濃度，每個因素設置2個水平，響應參數為純度，實驗設計如下圖所示：</p> <p style="color: #3e3e3e;"><strong>（注：以下參數為方便展示隨意設置，并非真實測試數據）</strong></p> <p style="color: #3e3e3e;">1.因子及因子水平</p> <table style="color: #3e3e3e;" width="100%" cellspacing="0" cellpadding="7"><colgroup><col width="169" /><col width="170" /><col width="170" /></colgroup> <tbody> <tr valign="top"> <td bgcolor="#4472c4"> <p>因子</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>高水平</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>低水平</p> </td> </tr> <tr valign="top"> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>樣品及結合ph</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>8</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>5</p> </td> </tr> <tr valign="top"> <td> <p>保留時間min</p> </td> <td> <p>8</p> </td> <td> <p>2</p> </td> </tr> <tr valign="top"> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>平衡液鹽濃度mM</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>200</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>20</p> </td> </tr> <tr valign="top"> <td> <p>洗脫液鹽濃度mM</p> </td> <td> <p>800</p> </td> <td> <p>400</p> </td> </tr> </tbody> </table> <p style="color: #3e3e3e;">2.響應參數、標準及檢測方法</p> <table style="color: #3e3e3e;" width="100%" cellspacing="0" cellpadding="7"><colgroup><col width="169" /><col width="170" /><col width="170" /></colgroup> <tbody> <tr valign="top"> <td bgcolor="#4472c4"> <p>響應</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>標準</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>檢測方法</p> </td> </tr> <tr valign="top"> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>純度</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>95%</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p><span class="wx_search_keyword_wrap">HPLC</span></p> </td> </tr> </tbody> </table> <p style="color: #3e3e3e;">3.實驗設計（全析因實驗）</p> <table style="color: #3e3e3e;" width="100%" cellspacing="0" cellpadding="7"><colgroup><col width="82" /><col width="83" /><col width="83" /><col width="74" /><col width="74" /><col width="73" /></colgroup> <tbody> <tr valign="top"> <td bgcolor="#4472c4"> <p>因子</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>實驗次數</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>區組</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>基本設計</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>仿行</p> </td> <td bgcolor="#4472c4"> <p>中心點</p> </td> </tr> <tr valign="top"> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>4</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>19</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>1</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>4,16</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>1</p> </td> <td bgcolor="#d9e2f3"> <p>3</p> </td> </tr> </tbody> </table> <p style="color: #3e3e3e;"><img class="rich_pages wxw-img" src="https://img1.dxycdn.com/p/s14/2024/0708/847/2994658859513210181.png" alt="圖片" width="554" height="372" border="0" /></p> <p style="color: #3e3e3e;">對于每一組層析實驗，其流程包括柱料及緩沖準備、系統清洗、上樣、平衡、洗脫、再生等環節，步驟冗長，費時耗力，通常完成一個相當樣品量的層析測試可能需要4-6h</p> <p style="color: #3e3e3e;">對于一些純化平臺規模不大的單位，比如僅有2臺小試純化系統，完成全部組的實驗測試最低需要38h,效率低下，另外通常會導致人員加班或者隔日測試，如果采取隔日測試的方案，樣品存放時間過久可能導致理化性質的變化，尤其是對于分子設計不穩定的項目，進一步導致結果異常。</p> <p style="color: #3e3e3e;">所以又快又好的、能在一個工作日完成所有實驗組測試的高效率的<span class="wx_search_keyword_wrap">層析系統</span>的需求日益高漲。</p> <p style="color: #3e3e3e;">&nbsp;</p> <p><strong style="color: #3e3e3e;">0<span title="">2&nbsp;&nbsp;</span></strong><strong style="color: #3e3e3e;">在線配液連續層析技術</strong></p> <p style="color: #3e3e3e;"><img class="rich_pages wxw-img" src="https://img1.dxycdn.com/p/s14/2024/0708/574/2720590086513210181.png" alt="圖片" width="554" height="363" border="0" /></p> <p style="color: #3e3e3e;">&nbsp;</p> <p><strong style="color: #3e3e3e;">在線配液連續層析系統的特點如下：</strong></p> <p style="color: #3e3e3e;">1）無需手動配置工作緩沖液，無需手動摸索配方，只需貯備母液，緩沖液成本節省約40%；</p> <p style="color: #3e3e3e;">2）可實現7&times;24h連續層析或生產，大幅提升層析效率，產率提高40-50%；</p> <p style="color: #3e3e3e;">3）靈活適配反復使用或一次性管路，一次性管路無需清潔驗證；</p> <p style="color: #3e3e3e;">4）填料成本節省約30%；</p> <p style="color: #3e3e3e;">5）人工成本節省約50%；</p> <p style="color: #3e3e3e;">其中在線配液功能可選配，層析規模覆蓋小試、中試、生產，流速范圍0-3600L/h。連續層析技術可大幅節省層析時間成本，快速完成大量工藝開發及層析生產任務。</p> <p style="color: #3e3e3e;">&nbsp;</p> <p style="color: #3e3e3e;">在線配液連續層析技術通常的層析竄連邏輯如下：</p> <p style="color: #3e3e3e;"><img class="rich_pages wxw-img" src="https://img1.dxycdn.com/p/s14/2024/0708/999/2707859908513210181.png" alt="圖片" width="554" height="499" border="0" /></p> <p style="color: #3e3e3e;">*上樣-串聯方式，1柱流穿的蛋白被2柱捕獲，3層析柱進行洗脫再生等步驟；</p> <p style="color: #3e3e3e;">*沖洗-1柱達到設定的穿透點后，將未吸附的蛋白沖洗到3柱；2柱承接上樣</p> <p style="color: #3e3e3e;">*洗脫-1,3柱完成沖洗后，1柱單獨進入洗脫，3柱承接2柱穿透；</p> <p style="color: #3e3e3e;">&nbsp;</p> <p style="color: #3e3e3e;">2柱滿載后竄連1柱進入沖洗流程，3柱承接上樣；沖洗完畢后2柱單獨進入洗脫，竄連3,1柱進入上樣；3柱滿載后竄連2柱進入沖洗流程，1柱承接上樣，循環往復，流速不變，任何一個時間點均有1個層析柱在進行上樣，實現連續層析。</p> <p style="color: #3e3e3e;">在線配液連續層析系統的軟件界面如下：</p> <p style="color: #3e3e3e;"><img class="rich_pages wxw-img" src="https://img1.dxycdn.com/p/s14/2024/0708/051/8824615078513210181.png" alt="圖片" width="554" height="289" border="0" /></p> <p style="color: #3e3e3e;">&nbsp;</p> <p style="color: #3e3e3e;">內置4個系統泵分別配置酸、堿、鹽、水，每個泵鏈接3個入口。1個樣品泵同樣配置3個入口。工作緩沖液通過檢測器<span class="wx_search_keyword_wrap">反饋調節</span>，達標后流入系統，3根層析柱均適配紫外、電導、溫度、ph、壓力等檢測器，每根層析柱對應3組分出口。界面簡潔實用。</p> <p style="color: #3e3e3e;">&nbsp;</p> <p><strong style="color: #3e3e3e;">0<span title="">3&nbsp;</span></strong><strong style="color: #3e3e3e;">在線配液連續層析技術解決方案</strong></p> <p style="color: #3e3e3e;"><strong>廣州市艾貝泰生物科技有限公司是Sepragen徑向層析系統中國代理，歡迎咨詢相關產品。</strong></p>