簡介：
默克密理博的Amicon離心超濾裝置是一種理想的工具，可以用來對鹽分、糖類、核酸、非水溶劑及其他一些低分子量物質進行去除和更換。他們還可以用來分離未結合上的游離標記物。
密理博離心超濾裝置具有快速、方便、回收率高的特點，可替代并優于透析及乙醇沉淀。Amicon Ultra-4和Amicon Ultra-15具有高速度高回收的特點。他們使用低吸附性的Ultracel再生纖維素超濾膜，可用于蛋白質、抗原、抗體、酶和微生物的濃縮純化。其快速和高回收的特點非常適合于脫鹽和緩沖液置換。Amicon Ultra離心超濾裝置經常用于對蛋白質色譜純化過程產生的色譜柱組分進行濃縮和脫鹽。
以下兩個例子展示了Amicon Ultra離心超濾裝置對于蛋白質和活性酶回收的應用。
方法
1. 選擇具有合適NMWL和體積的離心超濾裝置；
2. 把樣品置于過濾裝置的儲液管中；
3. 如果樣品體積小于過濾裝置的最大體積，則可以把它稀釋到最大體積后再離心，這有助于更有效地除去鹽分；
4. 在特定的離心力下和推薦的時間進行離心；
5. 將濾過液從濾管中取出，放置一旁；
6. 加入水或緩沖液使樣品體積達到4ml(Amicon Ultra-4)或15ml(Amicon Ultra-15);
7. 再次離心；
8. 取出濾過液，放置一旁；
9. 回收濃縮的已脫鹽樣品。
注意：請將兩次的濾過液一直保留到濃縮的樣品分析測試完成。
結果：
鹽分通過濾膜的過程不依賴樣品的濃度和體積，用超濾的方法來脫鹽并不改變緩沖液的組成，比如說，含有500mM鹽分的溶液在初次離心后它的鹽濃度并不發生改變。再往超濾管中剩余溶液中加入水或無鹽緩沖液，再次離心，則會降低溶液中的鹽濃度。這個過程我們將它稱為等體積超濾，反復多次地操作，可以使溶液鹽分降到最低。如果我們想將樣品用不同打分緩沖液溶解，則我們可以使用等體積超濾達到目的。樣品濃縮后，然后加入目的緩沖液，再進行反復得稀釋和濃縮。
如表3.1-3.4中所示，使用默克密理博的離心超濾裝置，只需一次過濾，樣品中90%以上的鹽分都被去除。最后，只要再離心一次，可以使樣品中高達99%的鹽分都被去除，而且樣品的回收率高達90%以上。
用色譜法進行蛋白質純化，經常得到許多的色譜組分，而其中只有一些組分中含有目標蛋白質。將這些組分合并后，我們就可能需要通過一步蛋白質濃縮過程將蛋白質儲存起來，或者需要通過緩沖液置換將樣品濃縮，以便下游的分離。若有疑問，請致電技術支持熱線：400-889-1988 或致函china.bioscience.marketing@merckgroup.com
下期預告：
吲哚胺2,3-二氧化酶的濃縮
蛋白激酶R的濃縮和緩沖液置換
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