噬菌體展示技術是一種基于定向進化的高通量篩選技術,大大拓展了定向進化技術在抗體多肽改造篩選方面的應用。本文圍繞噬菌體展示技術的原理、發展歷程、應用、優勢、常見問題及解析五個主題為大家細致講解，讓您一文輕松讀懂噬菌體展示技術。

01Part1 什么是噬菌體展示技術

噬菌體展示技術通過將外源肽段和噬菌體衣殼蛋白融合展示于噬菌體表面，進行高通量篩選及富集，并對所需功能的克隆進行定性分析，該技術展示對象涵蓋抗體、抗體片段、肽段、cDNA等。在對抗體庫的研究中，噬菌體展示技術可對人和其他動物的B細胞抗體庫進行體外建庫篩選，避開了免疫和細胞融合等步驟從而縮短實驗周期并增加了穩定性，該技術還具有篩選容量大、可發酵大量生產、方法簡單等優點。

圖1噬菌體展示技術示意圖[1-3]

02Part2 噬菌體展示技術的發展歷程

1985年Smith實驗:某基因片段與III基因連接后會表達與噬菌體表面井可與特異性抗體結合

1986年Geysen的理論基礎，含關健aa殘基的短肽可以模擬蛋白上的抗原決定簇，蛋白間互作是通過局部肽段間的相互作用實現的

1988年Parmley和Smith實驗，B-gal表達于噬菌體表面，仍具有活性，可被持異性抗體識別

1900年George驗證，噬菌體不會因為外源DN**段的插入影響其本身的粘附、侵入、整合的功能

1990年Scott、 Cwirla、 Devlin實驗，fd、M1菌體構建隨機六肽庫，用抗體篩選出的段序列與抗原決定的部分序列一致，證實了噬薗體展示的理論基礎

2018年George P. Smith 和 Gregory P. Winter 教授因在“ 多肽及抗體的噬菌體展示” (“ thephage display of peptides and antibodies”)技術方面的開創性工作與應用獲得諾貝爾化學獎[1]

此后，隨著大量噬菌體展示文庫的構建、遺傳操作體系的建立以及展示平臺與體系的拓展，噬菌體展示技術在不同領域，尤其是在蛋白質和抗體相關領域中發揮重要作用。

03Part3 噬菌體展示技術的應用

診斷用的疫苗研發及生產

研究新型的基因導向系統

研究蛋白質與核酸相互作用

腫瘤研究及藥物靶向治療

酶抑制劑篩選

構建抗體/cDNA文庫

Eg1：從HBx（肝癌相關抗原）單抗細胞中克隆重鏈可變區基因，重組入M13噬菌體，驗證表達產物具有活性，然后表達出單鏈抗體、單域抗體或嵌合抗體，為肝癌導向治療研究提供基礎。

Eg2：為解決非典型嗜血流感桿菌毒力因子表面蛋白混合寡糖LOS制備疫苗遇到的免疫原型弱的問題，用兔抗LOS篩選肽庫，得到4個一致性序列，其中3個與兔抗親和力高。用篩選得到的3個高親和力肽免疫兔得到的抗體對染病小鼠模型具有抗體保護性作用。

04Part4 噬菌體展示技術常見問題與解答

戳這里：【抗體篇】-39丨噬菌體展示技術常見問題與解答

05Part5 金開瑞噬菌體展示技術服務

一、技術簡介技術簡介

金開瑞金開瑞開發的噬菌體展示技術服務平臺涵蓋了天然抗體庫、免疫抗體庫、scFv抗體庫、多肽庫等常用的文庫類型，同時我們還提供基于噬菌體抗體庫技術的雙特異性抗體定制和抗體人源化服務，為您提供高質量的抗體庫文庫及準確高效的篩選結果。

二、技術特點術優勢

1、固相和液相噬菌體展示文庫篩選經驗豐富，可自動化進行噬菌體展示高通量篩選，實現快速交付

2、天然抗體文庫庫容可高達1010及以上，免疫抗體文庫庫容可達至少107及以上

3、引入先進的親和力檢測技術，深入的生物信息學分析，選擇最佳的人源框架區序列快速且高通量篩選高親和力及高產量的人源化抗體

4、大于90%以上的片段插入率

三、技術流程

1.噬菌體抗體庫構建：

隨機多肽/蛋白多肽核酸序列合成

組織RNA抽提及cDNA制備目的基因/抗體基因克隆基因插入載體電轉大腸桿菌抗體庫庫容及多樣性檢測

2.抗體庫篩選：

靶分子暴露靶分子與噬菌體結合洗脫擴增得到篩選到的基因及表達產物。

四、服務內容容

參考文獻

[1] 曲戈，2018諾貝爾化學獎：酶定向進化與噬菌體展示技術，生物學雜志。

[2] Nobel Prizes 2018 [J]. Angew Chem Int Ed, 2018, 57: 14683 - 14683.

[3] The Nobel Prize [ EB / OL]. https: / / www. nobelprize. org / prizes/ chemistry /2018 / summary / .