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Carrier RNA常見類型、作用原理及優(yōu)缺點介紹

1. Carrier RNA概念及作用

熒光定量PCR是分子診斷主流技術(shù)，包括核酸提取和PCR擴增兩個環(huán)節(jié)，兩者共同決定了該檢測方法的評測參數(shù)。以最直觀最關(guān)鍵的檢測靈敏度指標來看，只有實現(xiàn)了提取環(huán)節(jié)最優(yōu)化和PCR擴增環(huán)節(jié)最優(yōu)化的情況下，檢測靈敏度的結(jié)果才更可信。檢測靈敏度顯示了檢測試劑的檢測下限，對于熒光定量PCR而言，即一定樣本濃度下的病毒核酸檢出率。

Carrier RNA，中文名載體RNA，又叫核酸助沉劑。在核酸提取環(huán)節(jié)，提取使用到的離心管壁多是聚丙烯的材料，管壁上有靜電，會吸附核酸。在提取純化過程中采用Carrier RNA 可幫助核酸去除靜電效應，保證核酸能很好被吸附到純化柱上，提高洗脫效率，從而達到盡可能多的回收樣本中核酸！

2. Carrier RNA常見類型

作為核酸沉淀的輔助物質(zhì)，Carrier RNA有多種類型。

3. 產(chǎn)品介紹——上海翌圣生物生產(chǎn)的Carrier RNA

翌圣生物Carrier RNA是酵母來源的RNA，無DNase、RNase酶殘留，蛋白和DNA殘留含量極低。可用于病毒核酸提取、微量DNA提取等實驗，提取的核酸可用于后續(xù)RT-PCR，RT-qPCR等實驗。產(chǎn)品分為液體和凍干型粉末制劑，便于直接使用和長距離運輸、保存。

本品為核酸混合物，產(chǎn)品使用非常簡單，在純化核酸過程中通過添加微克量（μg）的Carrier RNA，即可實現(xiàn)提升低至皮克級別（pg）微量核酸的沉淀效率，達到提升試劑檢測靈敏度的目的。

其作用原理主要是通過混入大量核酸（Carrier RNA），減少了目標核酸物質(zhì)的管壁吸附損失，進而提高微量的核酸純化柱上的結(jié)合和洗脫效率，同時降低了提取環(huán)境中的RNase降解微量RNA的概率。

4. 應用案例

● Carrier RNA的加入有助于低豐度SARS-CoV-2假病毒核酸檢測

使用磁珠法拭子樣本病毒DNA/RNA提取試劑盒，提取不同濃度的SARS-CoV-2假病毒樣本核酸，后續(xù)使用新冠檢測試劑盒進行檢測N基因。結(jié)果顯示，添加Carrier RNA后，具有更高的提取效率，使下游檢測更靈敏。

見圖1-1

● Carrier RNA放置于65℃不同時間（3d,6d,9d）后，與提取性能標準保存條件一致

將Carrier RNA粉末分別放置于65℃ 3d，6d，9d進行加速試驗測試，測試方案為：使用磁珠法拭子樣本病毒DNA/RNA提取試劑盒，提取不同濃度的SARS-CoV-2假病毒樣本核酸，后續(xù)使用新冠檢測試劑盒進行檢測orf1ab和N基因。結(jié)果顯示，與標準保存條件（-20℃）相比，置于65℃保存9天的Carrier RNA，性能不發(fā)生變化。

VIC：