細胞分選是指根據細胞所具有的特性把某種特定的細胞亞群從混合的細胞樣品中分離出來的一種技術,它是對某一特定細胞進行生化分析和功能分析的前提和基礎。
表1. 常見細胞分選技術對比
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常見細胞分選技術 |
分選結果 |
安全性 |
其他 |
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細胞磁性分選技術 |
1、適宜進行單Marker分選 2、分選純度好,得率高 3、分選對細胞無損,尤其適用于免疫細胞分選 |
1、納米級磁珠安全、可靠,無需額外去除 2、微米級別磁珠需要額外去除 |
1、不需要昂貴的設備、操作簡單 2、科研級、臨床級磁珠可選 |
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流式細胞分選技術 |
1、多Marker分選,純度高,得率好 2、傳統流式分選:高壓高速對細胞沖擊較大,細胞受損嚴重 |
1、容易交叉污染 2、帶熒光抗體使用存在爭論 |
1、設備昂貴、操作難度較大,需要專門操作人員進行操作和數據分析 |
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基于細胞密度的離心分選技術 |
1、回收率較差 2、無法分選獲得特定細胞亞群 |
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1、藥用級Ficoll液 |
由上表可知,細胞磁性分選技術由于其簡單快捷的操作,分選細胞純度好、得率高、活性好等特點,已成為目前使用最廣泛的細胞分選技術,同時搭配納米級磁珠(生物可降解基質,無需額外去除),可實現對所需細胞更安全、可靠的分選。
細胞磁性分選技術可進行陽性、陰性細胞分選。陽性細胞分選一般搭配有柱分離(陽選抗體磁珠一步標記),陰性細胞分選一般搭配無柱分離(陰選抗體加磁珠兩步標記)。
表2. 陽性細胞分選、陰性細胞分選對比
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細胞分選技術 |
陽性細胞分選(有柱分離) |
陰性細胞分選(無柱分離) |
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磁珠粒徑 |
粒徑<100 nm的磁珠 |
粒徑250 nm~4.5 μm的磁珠 |
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磁珠標記細胞 |
陽性抗體磁珠(帶一種需要細胞表面標識抗體的磁珠)加入細胞懸液孵育,磁珠標記需要的細胞。 |
生物素標記抗體Cocktail(所有不需要細胞的表面標識抗體)加入細胞懸液中孵育,鏈霉親和素磁珠再加入細胞懸液孵育,磁珠標記所有不需要的細胞。 |
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細胞分選 |
分離柱進磁鐵,加入磁珠標記細胞,加緩沖液洗出非標記細胞,分離柱取出磁鐵,用活塞析出磁珠標記細胞。 |
磁珠標記細胞的試管入磁鐵,并孵育,倒出非標記細胞,即為所需細胞。 |
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優點 |
分選細胞純度高、特異性高, 所需磁珠用量少。 |
需要的細胞未經標記。 |
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缺點 |
可能會對細胞產生一定的激活作用 |
需要知道所有不需要細胞的表面標識抗體,磁珠用量多,特異性稍差。 |
翌圣生物擁有高性能單克隆抗體研發平臺,憑借其豐富的抗體和磁珠等開發經驗,全力開發推出細胞分選產品,提供高質量的分選磁珠、耗材及設備,滿足客戶的研發和生產需求。目前已上新針對人免疫細胞的科研級CD3、CD4、CD8陽性分選磁珠,后續產品持續開發中。
翌圣生物提供細胞分選整體解決方案
表3. 翌圣分選磁珠系列產品選購指南
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產品貨號 |
37601ES |
37605ES |
37609ES |
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中文名稱 |
人CD3分選磁珠 |
人CD4分選磁珠 |
人CD8分選磁珠 |
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基質 |
葡聚糖納米磁珠 |
葡聚糖納米磁珠 |
葡聚糖納米磁珠 |
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配體 |
Anti-CD3 antibody
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Anti-CD4 antibody
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Anti-CD8 antibody
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粒徑 |
50-100 nm |
50-100 nm |
50-100 nm |
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規格 |
2 mL |
2 mL |
2 mL |
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分選能力 |
Up to 1×109 cells |
Up to 1×109 cells |
Up to 1×109 cells |
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儲存緩沖液 |
1 X PBS (pH7.2-7.4) containing 2 mM EDTA, 0.5% BSA buffer without Ca2+ |
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有效期 |
2~8℃避光保存,有效期6個月,嚴禁凍存。 |
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產品特點
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安全性高:磁珠粒徑與進口競品等同,低毒。
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效 果 好:純度高、活性高、回收率高。
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操作方便:生物可降解基質、無需額外去除。
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質 量 高:穩定性高、兼容性高。
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測試數據
純度、活性、回收率測試:
圖1. 翌圣CD3、CD4、CD8分選磁珠和進口競品富集免疫細胞的純度和回收率對比圖
備注:分別使用翌圣CD3、CD4、CD8分選磁珠與競品磁珠對PBMC樣本中的T細胞(細胞總量:1×107 )進行富集,通過流式檢測分選得到的細胞組分中 CD3、CD4、CD8 T細胞純度,并計算比較 CD3、CD4、CD8 T細胞的回收率。
產品信息
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產品名稱 |
貨號 |
規格 |
分選能力 |
目錄價/元 |
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Human CD3 Nanobeads 人CD3分選磁珠 |
2 mL |
Up to 1×109 cells |
5685 |
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Human CD4 Nanobeads 人CD4分選磁珠 |
2 mL |
Up to 1×109 cells |
5685 |
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Human CD8 Nanobeads 人CD8分選磁珠 |
2 mL |
Up to 1×109 cells |
5685 |
以上磁珠,我司均可提供測試裝規格100 μL(分選能力:Up to 5×107 cells),可在翌圣商城免費領取,或聯系當地銷售申請。
相關產品訂購
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產品名稱 |
貨號 |
規格 |
目錄價/元 |
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Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴細胞分離液1.077 |
100 mL/5×100mL |
219/989 |
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Lymphocyte Separation Medium 1.084 淋巴細胞分離液1.084 |
100 mL |
546 |
對應流式抗體詳見專題:CD分子流式抗體選購指南
