在生命科學研究領域，體外轉錄技術正以蓬勃之勢快速發展，成為眾多科研項目及生物制藥研發的關鍵技術支撐。在體外轉錄的復雜體系中，RNA聚合酶堪稱核心“主角”，其以DNA為模板催化合成互補RNA分子的功能至關重要。T7、T3與SP6 RNA聚合酶均為常用工具酶，其中T7 RNA聚合酶因具備高效的轉錄產能優勢，被廣泛應用于各類體外轉錄場景。而SP6 RNA聚合酶由于高度SP6啟動子序列識別特異性，在精準轉錄方面展現出獨特優勢，其與T7 RNA聚合酶形成功能互補，共同為不同科研需求提供差異化解決方案。

圖1. SP6 RNA Polymerase體外轉錄流程圖^[1]

SP6 RNA聚合酶是一種DNA依賴型的5'→3' RNA聚合酶，它能夠高度特異性地識別SP6啟動子序列，僅以SP6啟動子下游的DNA為模板，高效催化單鏈或雙鏈DNA SP6啟動子下游NTP（核苷酸三磷酸）的摻入，從而合成與模板DNA互補的RNA鏈。不僅如此，它還能兼容如生物素標記、熒光素標記等修飾的NTP，為多樣化標記RNA的合成提供了可能。憑借自身的特性，SP6 RNA聚合酶在科研與生物技術領域大顯身手，廣泛應用于以下場景：

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制備放射性標記的RNA探針

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體外轉錄制備mRNA疫苗

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制備基因編輯向導RNA

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制備siRNA、miRNA等小RNA

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合成RNA反義鏈，用于調控基因表達研究

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用于結構、加工和催化性能研究的RNA

翌圣生物全新推出的SP6 RNA聚合酶，具有高效轉錄活性，且該產品經過嚴格的質量控制，無內切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染，確保實驗結果不受干擾。

性能展示

翌圣SP6 RNA Polymerase (Cat#14810)

高效轉錄：體外轉錄效果媲美進口品牌

圖2. 翌圣SP6 RNA Polymerase與進口品牌同類產品SP6 RNA Polymerase以帶有SP6 Promoter的線性化質粒DNA為模板進行體外轉錄時的效果圖

注：分別添加不同酶活SP6 RNA Polymerase與0.1 μg帶有SP6 Promoter的線性化質粒DNA為模板進行體外轉錄，37℃孵育2h，70℃孵育10min終止反應，加入2U DNase I (10325ES)，37℃孵育15min消化模板DNA，得到的RNA轉錄產物為248 nt。取出10 μL反應產物，加入5μL 2 × RNA Loading Buffer，70℃變性10min，然后進行1%瓊脂糖凝膠電泳，用1X TAE作為電泳液，160V電泳20min，染色后拍照觀察結果。

無核酸外切酶、切口酶、非特異性核酸酶、RNase酶殘留

圖3. 翌圣SP6 RNA Polymerase核酸外切酶、切口酶、非特異性核酸酶、RNase殘留檢測結果

注：將SP6 RNA Polymerase分別與核酸底物孵育，并通過瓊脂糖凝膠電泳分析譜帶變化。實驗結果表明，翌圣的3個批次SP6 RNA Polymerase均未檢測出核酸外切酶（100 U）、切口酶（100 U）、非特異性核酸酶（100 U）或RNase（20U）殘留，為您的實驗結果準確性與可靠性保駕護航。

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參考文獻：

[1]Karikó K. Developing mRNA for therapy[J]. The Keio Journal of Medicine, 2022, 71(1): 31-31.

[2]Krieg P A, Melton D A. [25] In vitro RNA synthesis with SP6 RNA polymerase[M]//Methods in enzymology. Academic Press, 1987, 155: 397-415.