?Benzonase Nuclease高活力全能核酸酶
——消滅核酸,拒絕污染

1. 前言
核酸污染是生物樣本制備中常常遇到的問題。在蛋白純化的過程中,如果您提取的蛋白粘度很高、蛋白純化的得率很低、蛋白檢測的結果很差,那么您的樣本可能遭受了核酸污染。
如何去除核酸?超聲法和DNase/RNase酶法是常用的方法,但存在諸多缺陷(表1)。
表1 核酸去除,超聲法與DNase/RNase酶法優缺點
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? |
超聲法 |
DNase/RNase酶法 |
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優點 |
利用剪切力可在一定程度上降解核酸 |
利用核酸內切酶活性,可在溫和條件下,較好的消化核酸 |
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缺點 |
僅能打碎大片段核酸; 超聲過程產熱,易降解熱敏感的成分; 機械操作隨機性強,難評估核酸清除的有效性 |
在使用時需摸索兩種酶的最佳使用條件,操作繁瑣、可重復性差 |
為了高效、可重復性的去除核酸,建議您使用翊圣全能核酸酶(Benzonase Nuclease)。
2. 產品優勢
Benzonase Nuclease,是一種來源于Serratia Marcescen的基因工程酶,以二聚體形式存在,包含2個完全相同的亞基,單個亞基的分子量約為30 kD,因其能降解所有形式的DNA和RNA(包括單鏈、雙鏈、線狀、環狀、天然以及變性的核酸),且不具有堿基識別特異性,所以又稱全能核酸酶或廣譜核酸酶。不僅可應用在科研研究中作為生物樣本去除核酸干擾的首選酶制劑;還可應用于疫苗工業、蛋白和多糖類制藥工業,去除宿主殘留核酸,提高制品生物功效。

圖1 全能核酸酶結構圖
全能核酸酶,作為一種酶,其最重要的指標是活力和純度。翊圣生物選用進口優質原料,提供活力高于250 U/μL,比活高于1.0×106 U/mg蛋白,零內毒素污染,零蛋白酶污染,且每批次均經過嚴格質量控制和功能驗證的全能核酸酶,可保證高效、可重復性的降解所有形式的核酸,非常有助于防止蛋白凝集、降低蛋白溶液粘度、提高蛋白得率、提高病毒純化效率、改善蛋白電泳分辨率以及提高高通量測序質量等。
? 降解所有形式的DNA和RNA
? 無蛋白酶、內毒素污染
? 廣泛的試劑兼容性
? 超高的核酸消化活力
? 每批次產品嚴格質保與功能驗證
? 可有效應用于:
蛋白、病毒及其他生物樣本的純化
降低由核酸引起的樣本粘度
電泳、色譜、NGS、免疫學實驗樣本的制備
3. 產品性質
全能核酸酶消化核酸的作用原理為水解核苷酸間的磷酸二酯鍵,產生含3-8個堿基的5'-單磷酸寡核苷酸。在非常廣泛的條件下,全能核酸酶都能保持很高的穩定性和消化活力,這使其能夠與多種細胞裂解液,如RIPA,或含有多種離子和非離子型去污劑、還原劑的蛋白提取試劑等兼容。表1中列舉了全能核酸酶可發揮核酸消化作用的部分條件參數。除此之外,全能核酸酶還可耐受6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF,0.4% Sodium deoxycholate。
表2 全能核酸酶作用條件
|
條件參數 |
最適條件 |
可作用條件 |
|
Mg2+ |
1-2 mM |
1-10 mM |
|
pH |
8.0-9.2 |
6.0-10.0 |
|
Temp |
37℃ |
0-42℃ |
|
DTT |
0-100 mM |
>100 mM |
|
β-Mercaptoethanol |
0-100 mM |
>100 mM |
|
Monovalent cation(Na+,K+) |
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