?Benzonase Nuclease高活力全能核酸酶
——消滅核酸，拒絕污染
1. 前言
核酸污染是生物樣本制備中常常遇到的問題。在蛋白純化的過程中，如果您提取的蛋白粘度很高、蛋白純化的得率很低、蛋白檢測的結(jié)果很差，那么您的樣本可能遭受了核酸污染。
如何去除核酸？超聲法和DNase/RNase酶法是常用的方法，但存在諸多缺陷（表1）。
表1 核酸去除，超聲法與DNase/RNase酶法優(yōu)缺點
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? |
超聲法 |
DNase/RNase酶法 |
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優(yōu)點 |
利用剪切力可在一定程度上降解核酸 |
利用核酸內(nèi)切酶活性，可在溫和條件下，較好的消化核酸 |
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缺點 |
僅能打碎大片段核酸； 超聲過程產(chǎn)熱，易降解熱敏感的成分； 機械操作隨機性強，難評估核酸清除的有效性 |
在使用時需摸索兩種酶的最佳使用條件，操作繁瑣、可重復性差 |
為了高效、可重復性的去除核酸，建議您使用翊圣全能核酸酶（Benzonase Nuclease）。
2. 產(chǎn)品優(yōu)勢
Benzonase Nuclease，是一種來源于Serratia Marcescen的基因工程酶，以二聚體形式存在，包含2個完全相同的亞基，單個亞基的分子量約為30 kD，因其能降解所有形式的DNA和RNA（包括單鏈、雙鏈、線狀、環(huán)狀、天然以及變性的核酸），且不具有堿基識別特異性，所以又稱全能核酸酶或廣譜核酸酶。不僅可應用在科研研究中作為生物樣本去除核酸干擾的首選酶制劑；還可應用于疫苗工業(yè)、蛋白和多糖類制藥工業(yè)，去除宿主殘留核酸，提高制品生物功效。
圖1 全能核酸酶結(jié)構(gòu)圖
全能核酸酶，作為一種酶，其最重要的指標是活力和純度。翊圣生物選用進口優(yōu)質(zhì)原料，提供活力高于250 U/μL，比活高于1.0×106 U/mg蛋白，零內(nèi)毒素污染，零蛋白酶污染，且每批次均經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制和功能驗證的全能核酸酶，可保證高效、可重復性的降解所有形式的核酸，非常有助于防止蛋白凝集、降低蛋白溶液粘度、提高蛋白得率、提高病毒純化效率、改善蛋白電泳分辨率以及提高高通量測序質(zhì)量等。
? 降解所有形式的DNA和RNA
? 無蛋白酶、內(nèi)毒素污染
? 廣泛的試劑兼容性
? 超高的核酸消化活力
? 每批次產(chǎn)品嚴格質(zhì)保與功能驗證
? 可有效應用于：
蛋白、病毒及其他生物樣本的純化
降低由核酸引起的樣本粘度
電泳、色譜、NGS、免疫學實驗樣本的制備
3. 產(chǎn)品性質(zhì)
全能核酸酶消化核酸的作用原理為水解核苷酸間的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生含3-8個堿基的5'-單磷酸寡核苷酸。在非常廣泛的條件下，全能核酸酶都能保持很高的穩(wěn)定性和消化活力，這使其能夠與多種細胞裂解液，如RIPA，或含有多種離子和非離子型去污劑、還原劑的蛋白提取試劑等兼容。表1中列舉了全能核酸酶可發(fā)揮核酸消化作用的部分條件參數(shù)。除此之外，全能核酸酶還可耐受6 M Urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4% Triton X100，0.1% SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，0.4% Sodium deoxycholate。
表2 全能核酸酶作用條件
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條件參數(shù) |
最適條件 |
可作用條件 |
|
Mg2+ |
1-2 mM |
1-10 mM |
|
pH |
8.0-9.2 |
6.0-10.0 |
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Temp |
37℃ |
0-42℃ |
|
DTT |
0-100 mM |
>100 mM |
|
β-Mercaptoethanol |
0-100 mM |
>100 mM |
|
Monovalent cation（Na+，K+） |
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