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L-精氨酸誘導(dǎo)胰腺炎模型(Acute pancreatitis, AP)
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急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是臨床上常見的急腹癥,病因復(fù)雜,病死率達(dá)5%~10%,
重癥AP死亡率高達(dá)20%~30%,目前發(fā)病機(jī)制尚未闡述,無特殊治療方式。目前活體AP動物
模型制作常用方法大致有胰管結(jié)扎法、十二指腸閉袢法、胰膽管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、
胰膽管注射法結(jié)合靜脈輸注法、蛙皮素聯(lián)用脂多糖腹腔內(nèi)注射法等。
生理條件下,胰腺大量攝取氨基酸以合成胰酶,但高濃度氨基酸聚集會破壞胰腺外分泌腺,
誘發(fā)AP。L-Arg(L-精氨酸)是應(yīng)用較為廣泛的用于誘導(dǎo)AP動物模型的堿性氨基酸。
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圖1 L-精氨酸分子結(jié)構(gòu)(CAS NO.74-79-3)
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牛黃膽酸鈉誘導(dǎo)胰腺炎建模步驟(僅供參考)
動物:
L-精氨酸可以誘導(dǎo)大多數(shù)動物發(fā)生AP,但是此類模型主要應(yīng)用于嚙齒類動物(如大鼠和小鼠)。
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溶液配置:
用0.85%鹽水制備L-精氨酸溶液,并過濾以使其無菌。
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造模方法:
L-Arg誘導(dǎo)AP動物模型,通常劑量為250-500mg/100g。L-Arg的作用呈劑量和時間依賴性,單次注射L-Arg 500mg/100g,
70-80%胰腺腺泡細(xì)胞在3d內(nèi)壞死,3次注射L-Arg 250mg/100g超過10d,近90%的腺泡被破壞。
1、大鼠:腹腔內(nèi)給藥1g/kg,1次;
2、小鼠:腹腔注射3×3或4×2.5 g/kg,10%,每次間隔1h。
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模型判定指標(biāo):
注射后3、6、12h檢測血清淀粉酶水平、胰腺組織的濕/干質(zhì)量比率及病理組織學(xué)評分,觀察24h生存指數(shù)
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表1 胰腺的組織學(xué)評估
| ? | ? | ? |
|
水腫 |
0 |
無水腫 |
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1 |
小葉間水腫 |
|
|
2 |
小葉間和中度小葉內(nèi)水腫 |
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3 |
小葉間水腫和嚴(yán)重的小葉內(nèi)水腫 |
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白細(xì)胞浸潤 |
0 |
無 |
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1 |
稀少的血管周圍浸潤 |
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|
2 |
中度血管周圍和稀少的彌漫性浸潤 |
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3 |
大量彌漫性浸潤 |
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壞死 |
0 |
無壞死 |
|
1 |
少于15%的胰腺細(xì)胞 |
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