LY2857785

MCE 國際站：LY2857785

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：1619903-54-6

純度：0.9992

貨號：HY-12293

存儲條件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年溶劑中 -80°C 2 年 -20°C 1 年

運輸條件：美國大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產品活性：LY2857785 是一種I型可逆的 ATP 競爭性的 CDK9，CDK8 和 CDK7 抑制劑，IC50 分別為 11 nM，16 nM 和 246 nM。

體外：LY2857785 對 114 種蛋白激酶表現出良好的選擇性，只有 5 種其他蛋白激酶被抑制，其效力 (IC50) 小于 0.1 μM，總共 14 種激酶的效力小于 1 μM。在細胞水平上，LY2857785 抑制 U2OS 細胞中的 CTD P-Ser2 和 CTD P-Ser5，IC50 分別為 0.089 (n=13) 和 0.042 (n=1) μM。然而，LY2857785 僅誘導中等程度的 G2-M DNA 含量增加，從 35% 增加到 55%，EC50 為 0.135 μM。LY2857785 在 MV-4-11、RPMI8226 和 L363 細胞中表現出有效的化合物暴露和時間依賴性細胞增殖抑制。孵育 4 至 24 小時后，細胞生長抑制效力在 8 小時時達到最大，對 MV-4-11、RPMI8226 和 L363 細胞的 IC50 分別為 0.04、0.2 和 0.5 μM。LY2857785 誘導的癌細胞凋亡也具有時間依賴性，在 L363 細胞中 8 小時時達到最大效力，IC50 為 0.5 μM[1]。MCE 尚未獨立證實這些方法的準確性。它們僅供參考。

體內：在 HCT116 異種移植腫瘤小鼠中，LY2857785 表現出劑量依賴性 RNAP II CTD P-Ser2 抑制作用，TED50 為 4.4 mg/kg，TEC50 為 0.36 μM。在 HCT116 和 MV-4-11 裸鼠異種移植模型中，LY2857785 在 TED70（8 mg/kg）下還表現出持續時間較長的 CTD P-Ser2 抑制作用，持續時間為 3 至 6 小時。在裸鼠 MV-4-11 異種移植模型中，LY2857785 同樣表現出劑量依賴性 CTD P-Ser2 抑制作用，TED70（7 mg/kg）和 TED90（10 mg/kg）下持續 8 小時。 LY2857785 在 AML MV-4-11 異種移植腫瘤模型中表現出最顯著的腫瘤消退，無論是小鼠靜脈推注還是大鼠靜脈輸注[1]。MCE 尚未獨立證實這些方法的準確性。它們僅供參考。

動物實驗：小鼠和大鼠[1] 對于異種移植模型，將人類癌細胞 U87MG、MV-4-11、A375 和 HCT116 植入雌性裸鼠或無胸腺裸鼠體內。動物分別接受生理鹽水、雷帕霉素或 LY2857785 治療。裸鼠體內的 MV-4-11 異種移植瘤通過靜脈推注 LY2857785（4、8 和 18 mg/kg）治療。裸鼠體內的 MV-4-11 異種移植瘤通過靜脈輸注 LY2857785（3、6 和 9 mg/kg）治療，持續 4 小時。未經治療的對照組每 3 天靜脈注射一次生理鹽水。使用 Beckman Coulter 的 CXP 軟件進行流式細胞術分析。 LY2857785 和/或對照化合物的效果的統計學意義通過 Dunnett 方法、單因素方差分析進行評估。MCE 尚未獨立證實這些方法的準確性。它們僅供參考。

細胞實驗：將實體瘤細胞接種在聚-D-賴氨酸包被的96孔板中，將血液細胞系接種在未包被的96孔板中過夜，然后用化合物（例如LY2857785）處理。將實體瘤細胞在室溫下用Prefer固定20分鐘，然后用PBS中的0.1％Triton X-100滲透15分鐘。用抗活化的caspase-3通過免疫熒光測量caspase-3的表達。用原位細胞死亡檢測試劑盒測量末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記（TUNEL）活性。兩種測定均在Acumen Explorer激光掃描熒光微孔板流式細胞儀上進行分析。用CellTiter-Glo發光細胞活力測定法[1]測定血液腫瘤細胞的細胞活力。MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。它們僅供參考。

激酶實驗：CDK7 和 CDK9 反應混合物分別含有 10 mM Tris-HCl (pH 7.4)、10 mM HEPES、5 mM DTT、10 μM ATP、0.5 μCi 33p-ATP、10 mM MnCl2、150 mM NaCl、0.01% Triton X-100、2% DMSO、0.05 mM CDK7/9ptide 和 2 nM CDK7/Mat1/cyclin H 或 2 nM CDK9/cyclin T1。CDK8/cyclin C 反應在 HEPES 30 mM、DTT 2 mM、MgCl2 5 mM、0.015% Triton X-100、5 μM ATP 和 400 nM RBER-CHKStide（含 20 nM 酶）中進行。將 LY2857785 在 DMSO 中按 1:3 的比例連續稀釋，以測定劑量反應。反應在 96 孔聚苯乙烯板中進行。反應在室溫下孵育 60 分鐘，然后用 10% H3PO4 或 10% 三氯乙酸 (TCA) 終止。對于濾膜結合測定，將反應轉移到 96 孔濾膜中，并通過 Microbeta 閃爍計數器測量。對于 ADP Transcreener 熒光偏振測定，反應用 ADP 檢測混合物猝滅，在室溫下孵育 2 小時，然后在 Tecan Ultra 384 平板讀數器上以 λex=610 nm、λem=670 nm 測量 FP。使用制備的 ADP/ATP 稀釋系列作為標準曲線，根據毫極化 (μP) 計算 ADP 產物的濃度。激酶分析在 96 孔聚苯乙烯板中進行。簡而言之，在最終體積為 25 μL 的溶液中，將酶與適當的緩沖液、肽底物和稀釋的 LY2857785 一起孵育。通過添加 ATP/[33P] 來啟動反應，并將 ATP 混合物在室溫下孵育 40 分鐘。通過添加 5 μL 3% 磷酸來淬滅反應，將 10 μL 反應物滴到濾墊上，在 75 mM 磷酸中清洗 3 次，每次 5 分鐘，在甲醇中清洗 1 次。濾膜干燥后，進行閃爍計數[1]。MCE 尚未獨立證實這些方法的準確性。它們僅供參考。

IC50 & Target：CDK9 0.011 μM (IC50) CDK8 0.016 μM (IC50) CDK7 0.246 μM (IC50)

參考文獻：

[1]. Yin T, et al. A novel CDK9 inhibitor shows potent antitumor efficacy in preclinical hematologic tumor models. Mol Cancer Ther. 2014 Jun;13(6):1442-56. Mol Cancer Ther. 2014 Jun;13(6):1442-56.

品牌介紹:
•   MCE (MedChemExpress) 擁有200 多種全球獨家化合物庫，我們致力于為全球科研客戶提供前沿最全的高品質小分子活性化合物；
•   50,000 多種高選擇性抑制劑、激動劑涉及各熱門信號通路及疾病領域；
•   產品種類涵蓋各種重組蛋白，多肽，常用試劑盒，更有 PROTAC、ADC 等特色產品，廣泛應用于新藥研發、生命科學等科研項目；
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