隨著基因編輯技術的飛速發展，CRISPR-Cas9、TALEN、ZFN等工具已成為生命科學領域的核心利器。然而，基因編輯的成功與否，關鍵在于編輯效率的準確評估。如何快速、高效地檢測基因編輯的效率，成為了科研人員面臨的重要挑戰。傳統的檢測方法如測序等雖然準確，但耗時長、成本高，難以滿足高通量篩選的需求。因此，開發一種快速、簡便的檢測方法成為了當務之急。在這一背景下，T7核酸內切酶 I（T7 Endonuclease I）憑借其高靈敏度、快速反應和操作簡便的特點，成為評估CRISPR-Cas9等基因編輯工具效率的理想選擇。

T7 Endonuclease I是一種來源于T7噬菌體的核酸酶，能夠識別并切割不完全配對的DNA、十字形結構DNA、Holliday結構或交叉DNA、異源雙鏈DNA，也能以較慢速度切割帶切刻的雙鏈DNA，切割位點位于錯配堿基5´端的第一、第二或第三個磷酸二酯鍵。其應用于基因編輯效率檢測的作用機制如下：當基因編輯后，目標位點會形成含有錯配堿基的DNA雙鏈（如插入、缺失或點突變），T7 Endonuclease I能夠識別這些錯配位點，并在其附近進行切割，產生特定長度的DNA片段。

圖1.T7 Endonuclease I結構及作用過程示意圖[1]

基于T7 Endonuclease I在基因編輯效率檢測中的的重要地位，翌圣生物隆重推出純度高、切割活性強的T7 Endonuclease I (Cat#14548)，為您的基因編輯研究提供更高效、更穩定的工具。

性能展示

T7 Endonuclease I (Cat#14548)

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切割活性強

使用翌圣和來自進口Supplier A*的T7 Endonuclease I分別與含有錯配堿基的dsDNA底物進行孵育，并通過瓊脂糖凝膠電泳分析譜帶變化。實驗結果表明，翌圣20 U的T7 Endonuclease I能有效切割200 ng含有錯配堿基的dsDNA，且切割效果媲美來自進口Supplier A*的T7 Endonuclease I。

圖2.T7 Endonuclease I切割效果驗證（注：底物投入量-200ng）

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參考文獻

[1] Déclais A C, Hadden J, Phillips S E V, et al. The active site of the junction-resolving enzyme T7 endonuclease I[J]. Journal of molecular biology, 2001, 307(4): 1145-1158.

[2] Babon J J , Mckenzie M , Cotton R G H .The Use of Resolvases T4 Endonuclease VII and T7 Endonuclease I in Mutation Detection[J].Molecular Biotechnology, 2003, 23(1):73-81.DOI:10.1385/MB:23:1:73.

[3] Kazuki M , Shouta U , Junpei Y ,et al.Structure-specific DNA endonuclease T7 endonuclease I cleaves DNA containing UV-induced DNA lesions[J].The Journal of Biochemistry, 2024(1):1.DOI:10.1093/jb/mvae024.