COVID-19疫情已經爆發多月，全球人民的生活和生命都受到了極大的影響。經過多個月的研究，科學家們已經對新冠病毒有了比較系統的認識。新冠病毒主要靶點蛋白結構、結合受體以及中和抗體、疫苗等各方面都取得了很多突破性的研究進展。
SARS-COV-2的基因組大小為30kb，共編碼29種不同的蛋白質，包括蛋白酶、RNA依賴性RNA聚合酶（RdRp）、結構蛋白等。SARS-COV-2病毒體由結合到RNA基因組的核衣殼蛋白（N）、包膜（由M和E蛋白組成）及棘突蛋白（S，三聚體）構成。S蛋白由S1和S2兩個亞基組成。S1蛋白含有受體結合域結構（RBD），能夠與血管緊張素轉換酶2（ACE2）結合，結合后，S蛋白被宿主膜絲氨酸蛋白酶TMPRSS2裂解，促進病毒進入宿主細胞。
義翹神州在1月22日就全球首發上市新冠病毒重要靶點蛋白S-RBD，隨后又研發出新冠病毒的S1、S、N等一系列重組蛋白。近期還根據相關研究報道，陸續上線了新冠病毒RBD變異蛋白，包括V367F、F342L、A345S、K458R、V383A、N354D等。
那么義翹神州表達的這些重組蛋白質量怎么樣呢？接下來我們將會通過一系列的文章解讀來回答這個問題。用實力說話。
1. Science重磅：西湖大學首次成功解析ACE2全長結構
文章首次公開了新型冠狀病毒S蛋白受體結合結構域RBD與細胞表面受體ACE2全長蛋白復合物的三維結構，展示了新冠病毒侵染人體細胞的詳細過程。通過RBD和ACE2的相互作用示意圖，可以看出新冠病毒與SARS相似，S蛋白的RBD像一座橋一樣橫跨在ACE2蛋白表面，與ACE2緊密結合，這就是新冠病毒在人體內可以長驅直入的關鍵原因。
在這篇文章中，關于RBD-ACE2-B0AT1復合物的介紹時，寫到：
“To gain
insight into the interaction between ACE2 and the SARS-CoV-2, we purchased 0.2
mg recombinantly expressed and purified RBD-mFc of the SARS-CoV-2 (for
simplicity, we will refer it as RBD) from Sino Biological Inc., mixed it with
our purified ACE2-B0AT1 complex at a stoichiometric ratio of ~ 1.1 to 1, and
proceeded with cryo-grid preparation and im-aging. Finally, a 3D EM
reconstruction of the ternary complex was obtained.”
研究人員為了深入了解ACE2和新冠病毒之間的相互作用，將從義翹神州購買的0.2mg新冠病毒重組表達和純化的RBD-mFc，與實驗室純化獲得的ACE2-B0AT1復合物，以1.1:1的化學計量混合，然后進行低溫處理。最終獲得RBD-ACE2-B0AT1三元復合物的3D EM結構。
2. Nature：利用hACE2轉基因小鼠揭示SARS-CoV-2的致病性
ACE2是新冠病毒進入細胞的受體，來自中國醫學科學院的秦川團隊也以最快的速度構建了人ACE2轉基因小鼠模型，用來研究病毒的致病性。研究發現感染新冠病毒的hACE2小鼠體重下降，病毒在肺中復制，而在野生型小鼠中未觀察到相關現象，證明了新冠病毒在hACE2小鼠中的致病性。
研究人員通過ELISA確定hACE2轉基因小鼠與野生型小鼠中新冠病毒的特異性IgG。96孔板包被新冠病毒的S1蛋白（96-well plates were coated with Spike 1 protein of
SARS-CoV-2 (0.1 μg/100 μL, Sino Biological, 40591-V08H)）。結果在轉基因小鼠的血清中，21dpi檢測到靶向新冠病毒S蛋白的特異性IgG抗體。
研究人員為了進一步驗證小鼠模型在藥物研發和疫苗開發等方面的應用，在實驗室構建了抗新冠病毒Spike 1蛋白的抗體。
“Mice were immunized
with purified SARS-CoV-2 S1 protein (Sino bio-logical) and splenocytes of hyper
immunized mice were fused with myeloma cells. Positive clones were selected by
ELISA using SARS-CoV-2 S1 protein (Extended Data Figure 5). The cell
supernatant of 7D2 clone, binding to SARS-CoV-2 S1 protein, was collected for
immunofluores-cence analysis.”
利用購自義翹神州的SARS-COV-2 S1蛋白免疫小鼠，然后將高度免疫的小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合。使用包被SARS-CoV-2 S1蛋白的ELISA試劑盒篩選陽性克隆。收集與S1蛋白結合的7D2克隆細胞上清液用于免疫熒光分析。結果發現hACE2轉基因小鼠中新冠病毒S蛋白與hACE2蛋白在肺泡上皮細胞中存在共定位，而對照組無此現象。說明新冠病毒進入細胞需要ACE2受體。
3. Nature：從“非典”患者康復者中獲得新冠病毒中和抗體
本研究從感染SARS患者的記憶B細胞中鑒定出靶向SARS-COV-2 S蛋白的多個單克隆抗體。記憶B細胞是在患上感染性疾病后形成的，可以持久存在，甚至永久存在。在本次研究中獲得25種具有SARS-COV-2交叉反應性的抗體，其中有8株可以與脫毒和感染的細胞結合。
為了測定抗體對新冠病毒和SARS的RBD蛋白的親和力，研究人員利用Octet技術檢測了S309、S303、S304、S315這4株抗體與RBD蛋白的相互作用。在實驗中，選擇購自義翹神州的SARS-CoV RBD-rabbitFc和SARS-CoV-2 RBD-mouseFc蛋白，以1ug/ml的濃度關聯15分鐘。結果顯示中和抗體以納米甚至亞皮摩爾親和力結合病毒的RBD蛋白。
4. Cell：從新冠病毒康復者體內篩選出高效中和抗體
研究人員從60名COVID-19康復患者中篩選出14個具有強中和能力的單克隆抗體，其中BD-368-2中和假病毒的IC50值達到1.2ng/mL，中和SARS-CoV-2活病毒的IC50值為15ng/mL。進一步，該抗體在hACE2轉基因小鼠中也展現出杰出的治療和預防效果。
在這篇文章中，從抗原結合B細胞富集到單克隆抗體與RBD蛋白結合親和力測定、與ACE2競爭力分析，再到利用Octet技術鑒定抗體結合的表位，一直利用義翹神州的生物素化S-RBD蛋白進行試驗。
以上文章是新冠病毒入侵機制研究、中和抗體篩選、藥物研發等方面具有代表性的突破研究。義翹神州作為一家生物試劑研發和生產公司，制備的新冠病毒蛋白能夠為這些研究結果“添磚添瓦”，獲得了客戶的充分信任。正如總經理張杰博士所說：“為生物醫學領域的科學家，尤其是從事傳染病診斷與治療的科研人員，提供高質量的試劑，以此推進全球公共健康事業的發展，一直以來都是義翹神州的責任與使命。”
最后，我們再來看看SARS-CoV-2 S-RBD蛋白的“質檢報告”吧。
HEK293細胞表達，蛋白純度>95%
蛋白與ACE2結合活性（Octet）：親和常數為0.56 nM
更多新冠病毒蛋白請查看（官網鏈接）
參考文獻：
1. Sunney Xie, et al. Potent neutralizing antibodies against SARS-CoV-2 identified by high-throughput single-cell sequencing of convalescent patients’ B cells. Pre-proof
2. David Veesler, et al. Cross-neutralization of SARS-CoV-2 by a human monoclonal SARS-CoV antibody. Accelerated Article Preview
3. Chuan Qin, et al. The Pathogenicity of SARS-CoV-2 in hACE2 Transgenic Mice. Nature. 2020 May 7. doi: 10.1038/s41586-020-2312-y. Online ahead of print.
4. Qiang Zhou, et al. Structural Basis for the Recognition of SARS-CoV-2 by Full-Length Human ACE2. Science. 2020 Mar 27; 367(6485): 1444-1448.doi: 10.1126/science.abb2762. Epub 2020 Mar 4.