DNA測序技術是分子生物學研究中最常用的技術，它的出現極大地推動了生物學的發展。成熟的DNA測序技術始于20世紀70年代中期。1977年Maxam和Gilbert報道了通過化學降解測定DNA序列的方法。同一時期，Sanger發明了雙脫氧鏈終止法。20世紀90年代初出現的熒光自動測序技術將DNA測序帶入自動化測序的時代。這些技術統稱為第一代DNA測序技術。
第一代測序技術在分子生物學研究中發揮過重要的作用，如人類基因組計劃(humangenomeprojec，tHGP)主要基于第一代DNA測序技術。目前基于熒光標記和Sanger的雙脫氧鏈終止法原理的熒光自動測序儀仍被廣泛地應用。
Sanger法因操作簡便，得到廣泛的應用。后來在此基礎上發展出多種DNA測序技術，其中最重要的是熒光自動測序技術。
熒光自動測序技術基于Sanger原理，用熒光標記代替同位素標記，并用成像系統自動檢測，從而大大提高了DNA測序的速度和準確性。早在1985年，Smith等采用激光激發標記的熒光，并用CCD檢測，比常規電泳測序速度提高9倍，測序速度達到8000bp/h以上。
20世紀80年代初Jorgenson和Lukacs提出了毛細管電泳技術(capillaryelectrophoresis)。1992年美國的Mathies實驗室首先提出陣列毛細管電泳(capillaryarrayelectrophoresis)新方法，并采用激光聚焦熒光掃描檢測裝置，25只毛細管并列電泳，每只毛細管在15h內可讀出350bp，DNA序列分析效率可達6000bp/h。1995年Woolley研究組用該技術進行測序研究，使用四色熒光標記法，每個毛細管長35cM，在9min內可讀取150個堿基，準確率約97%。
目前，應用最廣泛的應用生物系統公司(appliedbiosystems，ABI)3730系列自動測序儀即是基于毛細管電泳和熒光標記技術的DNA測序儀。如ABI3730XL測序儀擁有96道毛細管，4種雙脫氧核苷酸的堿基分別用不同的熒光標記，在通過毛細管時不同長度的DNA片段上的4種熒光基團被激光激發，發出不同顏色的熒光，被CCD檢測系統識別，并直接翻譯成DNA序列。
Sanger測序是DNA測序技術的金標準，曾在人類基因組計劃中發揮了關鍵推動作用，并且現在仍被用來獲得高度準確且可信賴的測序數據。