傳說中，一個高質量的ELISA試劑盒，在準確度、精密度、靈敏度、特異性、穩定性等方面都有著異于常盒的表現。
那么，一個高質量的ELISA試劑盒，究竟是如何誕生的呢？
下面，就跟隨我們的一個真實案例，一起去看看吧~~
試劑盒開發之前，經過與客戶的具體溝通，我們了解到客戶的實際需求，
并制定了以下開發流程：
基因合成及載體構建——重組蛋白制備——動物免疫——抗體對篩選——ELISA試劑盒開發
下面，就讓我們來具體看看吧：
1、 重組蛋白制備
我們先針對目標蛋白的表達難度、抗原表位、結構域及同源性做了全面且細致的分析評估，確定了抗原的表達區間，然后采用大腸表達系統，制備出了純度不低于90%的重組蛋白用于免疫。
2、 動物免疫
我們采取2種方案，免疫8只BalB/C小鼠，效價如下：
3、 抗體篩選
抗體篩選階段，我們首先采用高通量融合篩選方式，將內源樣本的檢測及表位分組提前在亞克隆階段，大大提高了抗體制備的成功率和篩選的主動性。
在經過亞克隆階段驗證和抗體純化后，我們最終得到的抗體效價如下：
4、 ELISA試劑盒開發
為了保證所開發的ELISA試劑盒的質量，我們對最后到達質控平臺的抗體原料做了檢測限標曲調試，并從熱穩定性以及同類指標的交叉反應等方面驗證了抗體批內批間的變異系數，對抗體對的性能做了全面的評估。
此后，我們建立了ELISA檢測方法，確定了標準曲線及線性范圍，并提供ELISA基本參數進行評價，建立了樣品檢測及評價方法。
- 標曲確定
- 測樣初定量
- 凍干驗證及測樣
- 熱穩定性測試
- 樣本線性測試
- LOD及批內批間測試
最終開發出的試劑盒檢測范圍為0.03125 ng/mL-2 ng/mL，靈敏度為10.242 pg/mL，批內差CV%<8%，批間差CV%<10%，且在特異性方面只識別目標蛋白，與其他相關蛋白無交叉反應。
（文中所有數據圖片均經客戶同意后公開)
至此，一個ELISA試劑盒就誕生了
總結一下，ELISA試劑盒的質量取決于其原料，也就是抗體對的質量
抗體對的質量體現在它的靈敏度、穩定性和交叉反應
我們在抗原設計和抗體篩選階段，就將其應用考慮進去，提高抗體制備的成功率，也大大保證了抗體對的質量。
金開瑞擁有基因合成平臺、蛋白表達平臺、抗體制備平臺，并具備多年的試劑盒開發經驗。提供從基因合成、抗原制備、抗體制備到ELISA試劑盒生產的一站式服務，帶給您前所未有的便利。
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